変異Cu/Znスパーオキシド・ジスムターゼによる運動ニューロン変性機構の解明

• Project/Area Number: 09770439
• Research Category: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Neurology
• Research Institution: Niigata University
• Principal Investigator: 中野 亮一 新潟大学, 医学部附属病院, 助手 (00262444)
• Project Period (FY): 1997 – 1998
• Project Status: Completed (Fiscal Year 1998)
• Budget Amount: ¥2,200,000 (Direct Cost: ¥2,200,000); Fiscal Year 1998: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000); Fiscal Year 1997: ¥1,200,000 (Direct Cost: ¥1,200,000)
• Keywords: 筋萎縮性側索硬化症 / スーパーオキシドジスムターゼ / 遺伝子変異 / トランスジェニックマウス / トランスジェニックスマウス

Research Abstract

家族性筋萎縮性側索硬化症(FALS)の一部はCu/Znスーパーオキシド・ジスムターゼ(SODl)の遺伝子変異が原因であることが発見されたが、この遺伝子変異による運動ニューロンの変性メカニズムはまだ不明である。本研究ではその変性メカニズムを解明することを目的として変異SODlトランスジェニックマウス(TG)を作成することを計画のひとつとしている。昨年度は導入遺伝子として変異を導入したcDNAを用いた系でTGを作製したが、導入遺伝子由来のmRNA発現が確認されたにもかかわらず、タンパクの発現が得られなかった。今年度はゲノム遺伝子を導入遺伝子として用いた系でTG作成を試みた。Kunkel法によりIlel3Thr変異を導入したヒトSODlゲノムDNA断片(12kb)をマイクロインジェクションによりBDFlマウスの受精卵雄性前核に注入し、3ラインのTGマウスを得た。これらのマウスでは導入遺伝子由来の変異SODlmRNAの発現がRT-PCRおよびNorthern blotで確認され、さらにWestern blotにより導入遺伝子産物の発現も確認された。これらのマウスは、これまでの変異SODlTGの報告例に比較して変異蛋白の発現量が生理的なレベルに近く、神経細胞の傷害機構の解析や治療薬の開発により有用なマウスであると思われる。

Research Products

• [Publications] Takashi Koide: "Formation of granular cytoplasmic aggregates in cells expressing mutant Cu/Zn superoxide dismutase associated with familial amyotrophic lateral sclerosis." Neuroscience Letters. 257. 29-32 (1998)
• [Publications] Shoichi Sasaki: "Familial amyotrophic lateral sclerosis with widspread vacuolation and hyaline inclusions." Neurology. 51. 871-873 (1998)
• [Publications] 中野亮一: "遺伝子診断 「筋萎縮性側索硬化症」" 臨床検査. 42. 1148-1152 (1998)
• [Publications] 中野亮一: "Cu/ZnSOD遺伝子変異と運動ニューロン変性機構" Clinical Neuroscience. 16. 855-859 (1998)
• [Publications] 中野亮一: "整形外科疾患からみた分子生物学" 南江堂、東京, 210 (1998)
• [Publications] Koki Kikugawa: "A missense mutation in the SODl gene in patients with amyotrophic lateral sclerosls from the Kii Peninsula and its vicinity,Japan." Neurogenetics. 1. 113-115 (1997)
• [Publications] 中野亮一: "筋萎縮性側索硬化症と細胞内情報伝達系" 神経精神薬理. 19. 129-139 (1997)
• [Publications] 中野亮一: "神経疾患モデル動物" KIDS (Kirin Information on Drugs and Science). 7. 12-13 (1997)
• [Publications] 中野亮一: "Cu/Zn SODと筋萎縮性側索硬化症" 内科. 80. 366-367 (1997)
• [Publications] 中野亮一: "家族性筋萎縮性側索硬化症" 臨床検査. 41. 1261-1266 (1997)
• [Publications] 中野亮一: "KEY WORD1997-'98 神経変性疾患" 先端医学社(東京), 279 (1997)