アポトーシスによる心筋細胞の電気生理的特性の変化の検討
| Project/Area Number |
09770480
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Field |
Circulatory organs internal medicine
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
安井 健二 名古屋大学, 環境医学研究所, 助手 (70283471)
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| Project Period (FY) |
1997 – 1998
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 1998)
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| Budget Amount *help |
¥2,400,000 (Direct Cost: ¥2,400,000)
Fiscal Year 1998: ¥500,000 (Direct Cost: ¥500,000)
Fiscal Year 1997: ¥1,900,000 (Direct Cost: ¥1,900,000)
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| Keywords | アポトーシス / 心筋細胞 / イオンチャネル / スフィシゴシン / 細胞密度 |
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| Research Abstract |
中間報告書のごとく、1)成熟ラット培養心室筋細胞の実験では、アポトーシス誘発物質であるスフィンゴシンにより処理した細胞ではL-type Ca電流が有意に抑制された。その電流密度は、コントロールで、5.7pA/pF,スフィンゴシン1μMで2.9pA/pF、3μMで2.7p,A/pF、10μMで2.4pA/pFであり、電流量も容量依存的に減少をきたし、アポトーシス細胞では心筋収縮に重要な役割を果たす細胞外からのCa流入が傷害をうける事が判明した。
2)新生児ラット培養心室筋細胞を用いた実験では、Cell-cell interactionが心筋細胞のアポトーシスの抑制に関わっていることを解明した。以下に詳細を記載する。
TUNEL法によるアポトーシス発生率は、培養細胞密度がconfluentの場合低く、sparseの場合高率である。まず培養液をconfluentの培養液で置換すると、アポトーシスが抑制される点から、培養細胞から分泌される未知の因子が、自身の生存を維持させる可能性が判明した。次にgap junctionを介する細胞間のコミュニケーションがアポトーシス抑制に働く可能性を調べるため、コネキシン43のantisenseによる検討を行った。Antisense群ではコネキシン43蛋白の発現は70%ほどに抑制されることを、Westernブロットで確認した。免疫組織染色では、コネキシン43蛋白発現が抑制された細胞でTUNEL法陽性の細胞が多かった。以上より、Gapjunctionおよび細胞から分泌される液性因子の両者の系を介して、Cell-cell interactinが心筋細胞の生存に大きな役割を果たしていることが判明した。
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Report
(2 results)
Research Products
(6 results)
