| Project/Area Number |
09771269
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Field |
Obstetrics and gynecology
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
那波 明宏 名古屋大学, 医学部, 助手 (90242859)
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| Project Period (FY) |
1997 – 1998
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 1998)
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| Budget Amount *help |
¥2,200,000 (Direct Cost: ¥2,200,000)
Fiscal Year 1998: ¥600,000 (Direct Cost: ¥600,000)
Fiscal Year 1997: ¥1,600,000 (Direct Cost: ¥1,600,000)
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| Keywords | 卵巣癌細胞株 / フィブロネクチン / MMP9 / FAK / dominant-negative Ras / MAPK / インテグリン-FAK-Ras path way / MMP-9 / phosphorothioate antisense oligo |
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| Research Abstract |
本研究では、卵巣癌細胞株を用いて、フィブロネクチン(FN)によるMMP-9分泌増強のメカニズムを解明することを目的とした。囮からの細胞内へのシグナル伝達はそのレセプターであるインテグリンα5β1を介すると考えられる。そのため、その下流に存在し、FNのシグナル伝達に重要な役割を果たしていると考えられるFocal adhesion kinase(FAK)及びその活性化に関わっていると考えられているRas遺伝子に着目した。FAK antisense-oligonucleotides 20μgをエレクトロポレーションにより卵巣癌細胞株に導入しFNによるMMP-9分泌をザイモグラフィーで調べたところFAK sense-oligonucleotides 20μg導入細胞及び非導入細胞と比べそれそれ1/2に低下した。次に、dominant-negative Ras導入卵巣癌細胞株5クローンを得た。このクローンのうち、mutant Ras蛋白発現の低発現株、高発現株において、FNによるMMP-9分泌を非導入細胞と比較した。ザイモグラフィーでの検討によりそれぞれ1/2、1/3に低下していた。このことから、フィブロネクチン(FN)によるMMP-9分泌増強のpath wayとしてFAK、Ras遺伝子が関与していることが証明された。さらに、FNによりmitogen-acttivated protein kinase(MAPK)の活性が亢進することが知られているが、FAK-Ras path wayを介しているかどうかは確定していない。この活性は、dominant-negativeRas導入卵巣癌細胞、FAK antisense→oligonucleotides処理卵巣癌細胞株にてそれぞれ1/3および1/2に低下した。以上のことから、MAPKがMMP-9分泌増強に関与したインテグリン-FAK-Ras path wayに関わっていることも示唆された。
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