Campylobacter rectusの歯周病原性タンパク因子の分子生物学的解析

• Project/Area Number: 09771549
• Research Category: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Functional basic dentistry
• Research Institution: Tokyo Dental College
• Principal Investigator: 三浦 直 東京歯科大学, 歯学部, 助手 (10266570)
• Project Period (FY): 1997 – 1998
• Project Status: Completed (Fiscal Year 1998)
• Budget Amount: ¥1,800,000 (Direct Cost: ¥1,800,000); Fiscal Year 1998: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000); Fiscal Year 1997: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
• Keywords: 歯周病 / タンパク質 / 分子生物学 / Campylobacter rectus / 口腔細菌 / 感染症 / 嫌気性細菌

Research Abstract

歯周病の病巣には、圧倒的多数のグラム陰性嫌気性菌の増加が確認される。その中でCampylobacter rectusは、P.gingivalisやA.actinomycetemcomitansのような主要原因菌に比べて検出頻度が少なくまた、培養が難しいという理由からか、本菌に関する研究は数少ないので、その感染メカニズムについては殆ど知られていない。ところが最近になって進行性の歯周病局所に急増すると言われており、その実体を捉えることは意義のあることと考え、前年度より当科研費補助金にて研究を進めてきた。今までに得られた実績を箇条書きに記すと以下の通りになる。 1)培地の改良により本菌の大量培養に成功した 2)全菌体をマウスに免疫して複数のモノクローナル抗体を取得した 3)全菌体をウサギに免疫してポリクローナル抗体を得た 4)2のモノクローナル抗体を用いていくつかの性質を調べたところ、Crectusに特異的な抗体であったが、標準株および臨床分離株の間で反応性が若干異なり菌体表層成分にはhelerogeneityが存在することが示唆された 5)臨床サンプルを採取し、2のモノクローナル抗体との反応性を見た結果、重篤な患者のプラークを中心に本菌の存在を確認できた 6)3のポリクローナル抗体を用いて染色体DNA制限酵素断片より本菌の遺伝子のクローニングを試みた。 2、4、5)に関しては前年度中にInternational Association for Dental Research 76th大会(Nice,Franceにて)において発表を行った。今後の予定として4)についてはさらに実際の歯周病態とCampylobacter rectusとの関連性を検討することも予定している。5)については、臨床検査薬への応用の可能性も検討してみたい。6)については他のCampylobacter属との相同性がほとんどない特異な遺伝子配列をもつものなので更に時間をかけて解析を進めるつもりである。