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リン酸化されたシャペロニンの機能解析

Research Project

Project/Area Number 09780567
Research Category

Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Functional biochemistry
Research InstitutionTokyo Institute of Technology

Principal Investigator

田口 英樹  東京工業大学, 資源化学研究所, 助手 (40272710)

Project Period (FY) 1997 – 1998
Project Status Completed (Fiscal Year 1998)
Budget Amount *help
¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
Fiscal Year 1998: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
Fiscal Year 1997: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000)
Keywordsシャペロン / 分子シャペロン / GroEL / フォールディング / 熱ショックタンパク質 / シャペロニン
Research Abstract

本研究は,重要だがほとんど調べられていない熱ショック時におけるシャペロニンのはたらきを解析する。昨年度は好熱菌のシャペロニンがATP存在下でリン酸化されるという現象を詳細に調べた。本年度は、(1)シャペロニンのリン酸化がどの部位で起こっているのか、(2)リン酸化がシャペロニンの機能にどう影響しているのか、を調べた。
(1) リン酸化部位の同定-リン酸化シャペロニンを酸加水分解した後にリン酸化アミノ酸を解析した結果,好熱菌シャペロニンでのリン酸化残基はチロシンかスレオニンであることがわかった。さらに種々のプロテアーゼ分解および臭化シアン分解断片の解析から,リン酸化部位は,アミノ酸配列の315-489の中にあることもわかった。さらに詳細を調べている。
(2) リン酸化シャペロニンの機能解析-リン酸化シャペロニンを調製し,シャペロニンの機能にどう影響しているのか詳細に調べた。リン酸化の有無によってシャペロニン依存の蛋白質の折れ畳み、変性タンパク質との結合能力などに差があるのか調べたところ、予備的な結果からは両者に差があることがわかった。現在定量的に解析している。

Report

(2 results)
  • 1998 Annual Research Report
  • 1997 Annual Research Report
  • Research Products

    (9 results)

All Other

All Publications (9 results)

  • [Publications] Taguchi,H.: "Chaperonin from thermophilie,Thermus thermophilns" Methods Enzymol.290. 169-180 (1998)

    • Related Report
      1998 Annual Research Report
  • [Publications] Taguchi, H.: "ATP-,K^+-dependent heptamer exchange reaction produces hybrids between GroEL and chaperonin from Thermus thermophilus" J.Biol.Chem.272. 18155-18160 (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] Aoki, K.: "Calorimetric observation of a GroEL-protein binding reaction with little coutribution of hydrophobic interaction" J.Biol.Chem.272. 32158-32162 (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] Makino, Y.: "Chaperonin-mediated folding of green fluorescent protein" J.Biol.Chem.272. 12468-12474 (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] Yoshida, T.: "Structural and functional charaterization of homo-oligomeric complexes of α and β chaperonin subunits from the hyperthermophilic archaeon Thermococcus KS-1" J.Mol.Biol.273. 635-645 (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] Nakamura, N.: "Purification and molecular cloning of the group II chaperonin from the oudothermophilic archaren,Sulfulobns sp.Strain 7." Biochem.Biophys.Res.Commun.236. 727-732 (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] Teshima, T.: "Protein refolding system using holo-chaperonin from thermophitic bacterium, Thermus thermophilus" J.Ferment. Bioeng.(in press). (1998)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] Yamakoshi,M.,: "Molecular chaperones in the life cycle of proteins" Marcel Dekker, 648 (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] Taguchi,H.: "Guidebook to molecular chaperones and Protein-folding catalysts" Oxford University Press, 545 (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report

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Published: 1997-04-01   Modified: 2016-04-21  

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