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酵母のシグナル伝達系を利用したMAPキナーゼ阻害剤単離とMAPキナーゼの機能解明

Research Project

Project/Area Number 09780583
Research Category

Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Functional biochemistry
Research InstitutionOsaka City University

Principal Investigator

中村 太郎  大阪市立大学, 理学部, 助手 (30291082)

Project Period (FY) 1997 – 1998
Project Status Completed (Fiscal Year 1998)
Budget Amount *help
¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
Fiscal Year 1998: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
Fiscal Year 1997: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000)
KeywordsMAPキナーゼ / 酵母 / スクリーニング
Research Abstract

昨年度構築したスクリーニング系を用いて今年度は実際にスクリーニングを開始した。スクリーニングに用いたサンプルはカビ及び放線菌由来の粗培養抽出液であり、それぞれ、1137、1188種類、合計2325種類を2つのスクリーニング系(α-factorによる増殖停止を利用した系。CRV4遺伝子とMAPキナーゼカスケードの合成致死性を利用した系)に用いた。α-factorを利用した系は1次スクリーニングからポジティブな物は得られなかった。crv4変異株を利用した物は野生株よりcrv4変異株の方により強く作用するサンプルが3種類得られた。
次にこれらのサンプルがどこに作用するかを遺伝学的手法を使って調べた。まず、crv4変異株にMAPキナーゼカスケードの構成因子を活性化させたもの(MAPKKKホモログのBCK1優性活性化型変異、MAPKホモログの多コピー型)を導入して薬剤の感受性が抑圧されるかを調べた。しかしながらいずれの場合にも薬剤感受性は抑圧されなかった。この結果は用いたサンプルの作用点がMAPKよりも下流かMAPキナーゼカスケードとは別のCRV4関連情報伝達系に起こっていることを示唆している。よって残念ながら今回のスクリーニングでは目的とする薬剤の取得には成功できなかった。今後は(1)スクリーニングのサンプル数をもっと(10倍以上)増やすこと(2)一回のスクリーニングにかけるサンプル量をもっと増やすこと(今回のサンプルの多くは抗菌活性をしめさなかったため)などによって、目的とする薬剤のスクリーニングを続けていきたいと思っている。

Report

(2 results)
  • 1998 Annual Research Report
  • 1997 Annual Research Report
  • Research Products

    (1 results)

All Other

All Publications (1 results)

  • [Publications] Nakamura T.Ohmoto T.Hirata D Tsuchiya E.Miyakawa T: "Yeast Crv4/T+p1,a predicted type II membrane protein,is involued in an event important for growth,functionally overlapping with the event regulated by calcineurin-and Mpk1-mediated pathways" Molecular and General Genetics. 256. 481-487 (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report

URL: 

Published: 1997-04-01   Modified: 2016-04-21  

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