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哺乳類細胞のDNA複製に関与するDNAヘリカーゼBの解析

Research Project

Project/Area Number 09780619
Research Category

Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Molecular biology
Research InstitutionTohoku University

Principal Investigator

関 政幸  東北大学, 薬学部, 助手 (70202140)

Project Period (FY) 1997 – 1998
Project Status Completed (Fiscal Year 1998)
Budget Amount *help
¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
Fiscal Year 1998: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
Fiscal Year 1997: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000)
KeywordsDNA複製 / DNAヘリカーゼB / PCNA / 温度感受性変異株 / Replication Foci
Research Abstract

マウス温度感受性変異株tsFT848細胞は、非許容温度でDNA複製低下及びDNAヘリカーゼB活性の低下が観察される。初年度ではヘリカーゼBがtsFT848細胞の温度感受性の真の原因遺伝子か決定する実験を行い、直接の原因であることをほぼ確定できた。本年度は、ヘリカーゼBがいつ・どこで・誰とDNA複製に関与するか特定することを試みた。
1) WHEN:DNAヘリカーゼBに対する抗体とReplication Forkに常に存在することが知られるPCNAに対する抗体を用いて、2者の関係を間接免疫2重染色法を用いて解析した。GO期でもDNAヘリカーゼBは核内にすでに存在するが、PCNAはS期に入ってからDNAと安定に複合体を形成することがわかった。
2) WHERE:PCNAとDNAヘリカーゼBはReplication Site(RS)で常に挙動をともにするわけではなく、PCNAと局在が一致するものもあればいないものもある。以上を総合すると、ヘリカーゼBはPCNAよりは先にRSに入りDNA複製の開始に影響を与えうるが、その後Replication Forkから解離すると考えられる。
3) WHO:two-hybridスクリーニングにて、ヘリカーゼBと相互作用する候補としてG/Tmismatch specific tymine DNA glycosylaseをクローニングした。G/TミスマッチはReplication Forkの通過前に修復される必要があり、DNA複製の開始付近で働くDNAヘリカーゼBとの相互作用は、ゲノムの配列の維持に重要な意味をもつ可能性がでてきた。

Report

(2 results)
  • 1998 Annual Research Report
  • 1997 Annual Research Report
  • Research Products

    (5 results)

All Other

All Publications (5 results)

  • [Publications] Wang,W-S.et al.: "Cloning of two isoforms of mouse DNA helicase Q1/RecQL cDNA; a forms expressed ubiquitously and β form specially in the testis." Biochimica et Biophysica Acta. 1443. 198-202 (1998)

    • Related Report
      1998 Annual Research Report
  • [Publications] Seki,T.et al.: "Cloning of a cDNA encoding a novel mouse Topo III β prossessing negatively supercoiled DNA-relaxing activity,whose message is highly expressed in the testis." Journal of Biological Chemistry. 273. 28553-28556 (1998)

    • Related Report
      1998 Annual Research Report
  • [Publications] Seki,T.,et al.: "cDNA cloning of mouse BLM gene,the homologue to human Bloom's syndrome gene,which is highly expressed in the testis at the mRNA level." Biochimica et Biophysica Acta. 1398. 377-381 (1998)

    • Related Report
      1998 Annual Research Report
  • [Publications] Seki,T.et al.: "Isolation of a cDNA encoding mouse DNA topoisomerase III which is highly expressed at the mRNA level in the testis." Biochimica et Biophysica Acta. 1396. 127-131 (1998)

    • Related Report
      1998 Annual Research Report
  • [Publications] Sek.T, Seki M, Katada T. & Enomoto T.: "Isolation of a cDNA encoding mouse DNA topoisomerace III whose mRNA is highly ereprissed on the testi" Biochem.Biophys.Acta. (in press).

    • Related Report
      1997 Annual Research Report

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Published: 1997-04-01   Modified: 2016-04-21  

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