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導入遺伝子の発現を光で人為的に制御できる植物葉緑体形質転換系の開発

Research Project

Project/Area Number 09874170
Research Category

Grant-in-Aid for Exploratory Research

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field 植物生理
Research InstitutionKyoto University

Principal Investigator

豊島 喜則  京都大学, 大学院人間・環境学研究科, 教授 (60013166)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 椎名 隆  京都大学, 大学院人間・環境学研究科, 助手 (10206039)
Project Period (FY) 1997 – 1998
Project Status Completed (Fiscal Year 1998)
Budget Amount *help
¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
Fiscal Year 1998: ¥600,000 (Direct Cost: ¥600,000)
Fiscal Year 1997: ¥1,400,000 (Direct Cost: ¥1,400,000)
Keywords葉緑体 / 形質転換 / 転写 / 光 / プロモーター / psbD / psbA / 青色光
Research Abstract

「自的」葉緑体光応答プロモータを導入した葉緑体形質転換体を作成して、特定タンパク質の葉緑体での発現を特異的に誘導する系の開発を目指した。
「結果・考察」
1. 光化学系IIのD2タンパク質をコードする葉緑体psbD光応答プロモータからの転写が、恒明条件下で24時間周期の概日リズムによる活性変化を示すことを明らかにした。
2. in vitro転写でのプロモータ解析から、葉身下部のPEPは転写開始に-35および-10配列を要求するが、上部の葉緑体PEPは、Extended-10プロモータ配列(psbAプロモータ)あるいは上流エンハンサー配列(psbDプロモータ)を認識することで-35配列を欠いたプロモータからも転写を開始できることを明らかにした。コムギ葉の発達にともなったPEPのプロモータ認識性の変化は、全く新しい発見であり、今後シグマ因子が関与している可能性を検討する。
3. psbAプロモータのコントロール下でGFPを発現させるタバコ葉緑体形質転換体を作成した。遺伝子導入条件を最適化した結果、高率で葉緑体形質転換体を得られる系の確立に成功した。蛍光観察から、GFPが葉緑体で特異的に発現していることが確認された。一方、-35配列を破壊した変異プロモータの活性は、野生型に比較して低かった。今後、この系を利用して発達ステージに伴ったPEPのプロモータ認識性の変化についてin vivoで検討する。また、青色光応答性のpsbD光応答プロモータを導入した形質転換体の作成も行い、青色光による特定タンパク質の特異的誘導を試みる。

Report

(2 results)
  • 1998 Annual Research Report
  • 1997 Annual Research Report
  • Research Products

    (12 results)

All Other

All Publications (12 results)

  • [Publications] Shiina,T.: "rbcL transcript levels in tobacco plastids are independent of light: reduced dark transcription rate is compensated by increased mRNA stability." Plant Cell. 10. 1713-1722 (1998)

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      1998 Annual Research Report
  • [Publications] Nakahira,Y: "Circadian clock-regulated transcription of the psbD light-responsive promoter(psbD LRP)in wheat chloroplasts." Plant Physiol.118. 1079-1088 (1998)

    • Related Report
      1998 Annual Research Report
  • [Publications] Satoh,J.: "Two types of multi-subunit plastid RNA polymerase(REP)function distinctly in wheat seedlings depending on developmental stage of cells" Plant J. 印刷中. (1999)

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      1998 Annual Research Report
  • [Publications] Morikawa,K.: "Circadian-regulated expressionof a nuclear-encoded plastid sigma factor gene(sigA) in wheat seedlings." FEBS Lett.印刷中. (1999)

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      1998 Annual Research Report
  • [Publications] Shiina,T.: "Increased mRNA stability conpensates for reduced dark psbL transcription rates in tobacco plastids." Research in Photosynthesis. 印刷中. (1998)

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      1998 Annual Research Report
  • [Publications] Nakahira,Y.: "Ciradian-regulated transcription of the psbD light-responsive promoter(psbD LRP)in wheat chloroplasts." Research in Photosynthesis. (印刷中). (1998)

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      1998 Annual Research Report
  • [Publications] Satoh,J.: "Selective activation of the psvA and psbDpromoters in matured wheat chloroplasts." In Research in Photosynthesis. 印刷中. (1998)

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      1998 Annual Research Report
  • [Publications] Satoh,J.et.al: "characterization of dynamics of the pabD light-induced transcription in wheat chloroplasts." Plant Holecular Biology. 33. 267-278 (1997)

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      1997 Annual Research Report
  • [Publications] Ozawa,S.et al.: "Role of L protein (psbL gene product) in regulation of electron transter at the reducing side of photosystem II.I" Plant Holecular Biology. 34. 151-161 (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] Hoshida,H.et al.: "Electro paramagnetic rescrance and mutaticnal analyses revealed the involvoment of photosystem II-L subumt in the oxidation step of tyrz by P680^+ to from the tyr-Z^+ P680^+ state in photosystem II" Biochemistry. 36・40. 12053-12061 (1997)

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      1997 Annual Research Report
  • [Publications] Shiina,T.et al.: "Identitication of promoter elements involved in the cytosolic Ca^<2+> mediated photoregulation of maize cab-ml expresslon" Plant Physiology. 115. 477-483 (1997)

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      1997 Annual Research Report
  • [Publications] 中平洋一.豊島喜則: "葉緑体における転写制御機構" 日本農芸化学会誌. 71.11. 28-31 (1997)

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      1997 Annual Research Report

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Published: 1997-04-01   Modified: 2016-04-21  

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