| Project/Area Number |
09877120
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Exploratory Research
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Field |
Neurology
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| Research Institution | Hyogo University (1998-1999)
Showa Women's University (1997) |
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Principal Investigator |
鬼頭 昭三 兵庫大学, 附属研究所, 教授 (00010140)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
新郷 明子 兵庫大学, 附属研究所, 講師 (50309499)
仙波 純一 放送大学, 教養学部, 助教授 (30183429)
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| Project Period (FY) |
1997 – 1999
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 1999)
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| Budget Amount *help |
¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000)
Fiscal Year 1999: ¥500,000 (Direct Cost: ¥500,000)
Fiscal Year 1998: ¥600,000 (Direct Cost: ¥600,000)
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| Keywords | estrogen / カイニン酸 / 海馬 / 大脳皮質 / cDNA library / shot-gun PCR / β-estradiol / differential hybridization / cloning |
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| Research Abstract |
本研究では、大量のestrogenの慢性投与によって発現、または新たに出現した遺伝子をクローニングし、その生理学的意義を検討することを目的とした。estrogenという内因性のsex hormoneの大量投与が誘導する遺伝子を明らかにすることは、estrogenと脳機能の関連を考える上で重要である。
神経細胞毒として知られているカイニン酸もestrogenも共にラット脳内にIGF-1 mRNAの発現を促すことが従来の実験によって明らかにされている。そこでカイニン酸とestrogenのそれぞれの場合について検討を進めた。
Wistar系雄性6週齢ラットに、β-estradiol 1mg/kgを連続7日間腹腔内投与した。β-estradiol投与群及び非投与群(コントロール)の海馬及び大脳皮質よりmRNAを抽出し、cDNA libraryを作製した。probe DNAは投与群及び非投与群の各々のcDNA libraryよりshot-gun PCRで調製したものを用いた。投与群及び非投与群との間の比較はprobeの違いで選別され、screeningされるのは投与群のcDNAである。hybridizationは、non-radioactive methodで行った。また、カイニン酸投与ラットについては、2種の濃度のカイニン酸(6mg/kg、12mg/kg)を腹腔内に1回投与したラットを用いて、実験を進め、それぞれについて、いくつかのクローンを得た。
カイニン酸投与群からのクローンひとつからは、カイニン酸受容体とホモロジーの高い結果を、又、estradiol連続投与群からのクローンからは、estrogen受容体とホモロジーの高いものと、somatostatinとホモロジーの高いものを得た。
共に他にも配列未決定のクローンを得ている。
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