変異LMP1に対する細胞障害性T細胞応答不全の克服とEBV関連腫瘍のワクチン療法

• Project/Area Number: 09877142
• Research Category: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Pediatrics
• Research Institution: Tohoku University
• Principal Investigator: 土屋 滋 東北大学, 加齢医学研究所, 教授 (30124605)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 峯岸 正好 東北大学, 加齢医学研究所, 助教授 (20211592) ; 藤江 弘美 東北大学, 加齢医学研究所, 助手 (60282000)
• Project Period (FY): 1997 – 1998
• Project Status: Completed (Fiscal Year 1998)
• Budget Amount: ¥1,900,000 (Direct Cost: ¥1,900,000); Fiscal Year 1998: ¥600,000 (Direct Cost: ¥600,000); Fiscal Year 1997: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,300,000)
• Keywords: EBV関連B細胞増殖症 / ドナーリンパ球輸注 / 細胞障害性T細胞 / LMP1 / EBV関連B細胞増殖症候群

Research Abstract

1. ドナーリンパ球輸注(DLT)を行った骨髄移植後EBV関連リンパ球増殖症候群
(B-LPD)患者の経過観察:骨髄移植後のWiskott-Aldrich症候群患者に合併したB-LPDに対しDLTを施行し2年半が経過したが、再発もなく良好な経過である。血中IgM濃度は334mg/dlと未だ300mg/dl台であるが、IgGは1162mg/dlと正常化した。CD4は27.7%、CD8は46.1%と未だCD4/CD8の逆転はあるが、CD40L誘導能は正常化した。EBV感染自己B細胞株に対する細胞障害性T細胞(CTL)の誘導を試みたが、現在までCTLクローンは樹立されていない。
2. EBウイルス(EBV)感染症と蚊アレルギー:従来慢性活動性EBV感染症と蚊アレルギーの関連性に注目されている。NK細胞増多を伴った蚊アレルギー患者の末梢血から免疫磁気ビーズ法によりNK細胞を陽性選別し、NK(+)分画とNK(-)分画についてEBVゲノムをPCR法により増幅した。驚いたことにEBVゲノムはNK(-)分画にのみ認められた。従って増殖しているNK細胞にはEBVゲノムが存在しないことが判明した。当然NK細胞にはLMP1の発現も認められなかった。蚊アレルギー患者で増殖しているNK細胞の増殖機構とEBVの関連について明らかにすることは、蚊アレルギーにおけるEBVの役割を考える上で今後の大きな課題である。
3. LMP1特異的CTLの作製:Dr.Kiefより分与されたLMP1遺伝子を含むpSVgptMTLMとコントロールベクターpSV2gptを、エレクトロポレーション法によりヒトT白血病細胞株Jurkatに導入した。LMP1遺伝子の発現はフローサイトメーターおよびウェスタンブロット法にて確認した。現在LMP1遺伝子発現Jurkat細胞に対するCTLを作製し、その中からLMP1特異的CTLクローンを選別する作業を行っている。
研究協力者:藤江弘美(加齢医学研究所・助手)

Research Products

• [Publications] Futatani T et al.: "Deficient expression of Bruton's tyrosine kinase in monocytes from X-linked agammaglobulinemia as evaluated by flowcytometric analysis------" Blood. 91. 595-602 (1998)
• [Publications] Sasahara Y et al.: "Epstein-Barr virus-associated lymphoproliferative disorder after unrelated bone marrow transplantation in a young child with Wiskott-Aldrich syndrome" Pediatric Hematology and Oncology. 15. 347-352 (1998)
• [Publications] Kumaki S et al.: "Prolonged secretion of IL-15 in patients with severe forms of graft-versus-host disease after allogeneic bone marrow transplantation in children" International J Hematology. 67. 307-312 (1998)
• [Publications] Hossain A et al: "The Ah receptor is not involved in 2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin -mediated apoptosis in human leukemic T cell lines" J of Biological Chemistry. 273. 19853-19858 (1998)
• [Publications] Imaizumi M et al: "Mutation in the E-domain of RAR α portion of the PML/RAR α chimeric gene may confer clinical resistance to all-trans retinoic acid in APL" Blood. 92. 347-382 (1998)
• [Publications] Kumaki S et al: "Functional role of interleukin-4(IL-4) and IL-7 in the development of X-linked severe combined immunodeficiency" Blood. 93. 607-612 (1999)
• [Publications] Y.Ohashi et al.: "Successful treatment of steroid resistant severe acute GVHD with 24-h continuous infusion of FK506." Bone Marrow Transplantation. 19. 625-627 (1997)
• [Publications] N.Minegishi et al.: "Expression of GATA transcription factors in myelogenous and lymphoblastic leukemia cells." Int.J.Hematol.65. 239-249 (1997)
• [Publications] S.Tsuchiya et al.: "Decrease in Thy-1 expression on peripheral CD34 positive cells induceds by G-CSF mobilization." Tohoku J.Exp.Med.182. 157-162 (1997)
• [Publications] T.Futatani et al.: "Dificient expression of Bruton's tyrosine kinase in monocytes from X-linked agammaglobulinemia as evaluated by a flowcytometric analysis--" Blood. 91. 595-602 (1998)
• [Publications] 土田昌宏ら: "非血縁者間骨髄移植" 小児科臨症. 50. 2665-2672 (1997)
• [Publications] 土屋滋: "Diamond-Blackfan貧血の病因" 小児内科. 29. 1091-1094 (1997)