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新しいGTP結合蛋白(G_<13>)をかいしたイオンチャネル活性機序の解明

Research Project

Project/Area Number 09877220
Research Category

Grant-in-Aid for Exploratory Research

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Kidney internal medicine
Research InstitutionKumamoto University

Principal Investigator

冨田 公夫  熊本大学, 医学部, 教授 (40114772)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 野々口 博史  熊本大学, 医学部附属病院, 講師 (30218341)
Project Period (FY) 1997
Project Status Completed (Fiscal Year 1997)
Budget Amount *help
¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
Fiscal Year 1997: ¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
KeywordsGたんぱく / Clチャネル / パッチクランプ
Research Abstract

三量体GTP結合蛋白質のGa_<12>familyに属するGa_<13>のeffecter systemは未だ不明である。G proteinはadenylate cyclaseやphospholipase Cなどの酵素と共にKチャネルやCaチャネルをregulateすることが知られている。今回私達はGa_<13>のイオンチャネルに対する効果を検討した。Ga_<13>とcoupleすることが知られているthrombinをリガンドとして用いてCOS-7細胞でthrombinにより誘導される電流をパッチクランプ法により測定した。
Nystatin法によるvoltage clampにおいて、bath solution中のthrombin(1u/ml)により誘導されるCl電流が観察された。EGTA 10mMを添加したCa-freeの電極内液を用いたwhole cell法においても同様な電流が観察され、細胞内Caにindependentな現象と考えられた。この電流のI-V relationshipは-76mVから+24mVの範囲ではほぼohmicで、このCl電流はindomethacin(1mM)により抑制されたが、SITS(2mM)では変化はみられなかった。whole cell法において、電極内液に抗Ga_<13>抗体を加え、Cl電流への効果を観察した。wholw cell作成30分後、thrombin灌流によるCl電流の誘導は認められなかった。
これらのことより、Thrombin receptorはGa_<13>の活性化を介してCa independentにClチャネルを活性化していることが明らかになった。さらにGa_<13>が直接このチャネルを活性化している可能性についてinside-out patchにて検討中である。

Report

(1 results)
  • 1997 Annual Research Report
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    (6 results)

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All Publications (6 results)

  • [Publications] S.Naomi,: "Endothelin-1 inhibits endothelin converting enzyme-1 expression in cultured rat pulmonary endothelial cells." Circulation. 97. 234-236 (1998)

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  • [Publications] Y.Kitamoto,: "Vascular endothelial growth (VEGF) is an essential molecule for mouse kidney development : glomerulogenesis and nephrogenesis." J.Clin.Invest.,. 99. 2351-2357 (1997)

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  • [Publications] Kitamura, K.,: "Inhibition of nitric oxide synthase activity and nitric oxide-dependent calcium influx inrenalepithelial cells by cyclic adenosine monophosphate : implications for cell injury." J.Am.Soc.Nephrol.8. 558-568 (1997)

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  • [Publications] Disashi Tumba,: "Endothelin converting enzyme-1 gene expression in the kidney of spontanously hypertensive rats." Hypertension. 30. 1591-1597 (1997)

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  • [Publications] H.Nonoguchi,: "Low-protein diet and progression of chronic renal failure." Lancet. 350. 146 (1997)

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  • [Publications] Jun Koike,: "Quasi-steadiness approximationfor the two-compartment solute kinetic model." Kidney Int.52. 821-831 (1997)

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      1997 Annual Research Report

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Published: 1997-04-01   Modified: 2016-04-21  

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