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ヒトPTH受容体遺伝子の導入によるヒト破骨細胞形成系の確立

Research Project

Project/Area Number 09877355
Research Category

Grant-in-Aid for Exploratory Research

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Functional basic dentistry
Research InstitutionShowa University

Principal Investigator

須田 立雄  昭和大学, 歯学部, 教授 (90014034)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 自見 英治郎  昭和大学, 歯学部, 助手 (40276598)
宇田川 信之  昭和大学, 歯学部, 講師 (70245801)
新木 敏正  昭和大学, 歯学部, 講師 (90138420)
高橋 直之  昭和大学, 歯学部, 助教授 (90119222)
宇田川 信之  昭和大学, 歯学部, 講師 (20138382)
Project Period (FY) 1997 – 1998
Project Status Completed (Fiscal Year 1998)
Budget Amount *help
¥1,800,000 (Direct Cost: ¥1,800,000)
Fiscal Year 1998: ¥500,000 (Direct Cost: ¥500,000)
Fiscal Year 1997: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,300,000)
Keywords破骨細胞 / 骨芽細胞 / SaOS-2 / 破骨細胞分子因子(ODF) / PTHレセプター / M-CSF / ヒト抹消血単核細胞 / 共存培養 / ヒト抹消血 / 副甲状腺ホルモン / PTH / ヒト破骨細胞
Research Abstract

ヒト骨芽細胞SaOS-2細胞にPTH受容体遺伝子を導入したSaOS-4/3細胞を樹立し、更に本細胞を用いヒト破骨細胞形成系を確立した。
(1) 株化ヒト骨芽細胞SaOS-2にPTH受容体遺伝子を導入した細胞SaOS-4/3細胞を樹立した。親株のSaOS-2細胞をPTHで処理してもcAMPの産生亢進は殆ど起こらなかったが、SaOS-4/3細胞のcAMP産生能はPTHに反応して著しく上昇した。
(2) SaOS-4/3細胞とマウスの脾細胞の共存培養系に各種の骨吸収因子(PTH、1α,25(OH)2D3、PGE2、IL-6+可溶性IL-6受容体)を添加し、破骨細胞の形成を評価した。破骨細胞の形成はPTH添加により促進されたが、他の骨吸収因子は破骨細胞の形成を全く促進しなかった。一方、親株SaOS-2細胞とマウス脾細胞の共存培養系においては、PTHを含む各種の骨吸収因子は破骨細胞の形成を促進しなかった。
(3) ヒト末梢血単核細胞をSaOS-4/3細胞と共存培養すると、PTHに反応してヒト破骨細胞が形成された。象牙質切片上でPTHの存在下でこの共存培養を行うと切片上に多数の吸収窩が形成された。
(4) マウスの共存培養系と同様に、ヒト末梢血単核細胞とSaOS-4/3細胞の共存培養系における破骨細胞形成はGM-CSFにより強力に抑制された。また、M-CSF抗体によりマウスとヒトの破骨細胞形成は抑制された。
(5) SaOS-4/3細胞はPTH処理により破骨細胞分化因子(osteoclast differentiation factor,ODF)のmRNAの発現が誘導された。一方、親株SaOS-2細胞ではODF mRNAの発現は誘導されなかった。

Report

(2 results)
  • 1998 Annual Research Report
  • 1997 Annual Research Report
  • Research Products

    (12 results)

All Other

All Publications (12 results)

  • [Publications] Suda,T.,et al.: "Modulation of osteoclast differentiation and function by osteoblasts/stromal cells." Endocrine Rev.,. in press. (1999)

    • Related Report
      1998 Annual Research Report
  • [Publications] Takahashi,N.,et al.: "A new member of TNF ligand family,ODF/OPGL/TRANCE/RANKL regulates osteoclast differentiation and function." Biochem.Biophys.Res.Commun.,. in press. (1999)

    • Related Report
      1998 Annual Research Report
  • [Publications] Matsuzaki,K.,et al.: "Human osteoclast-like cells are formed from peripheral blood mononuclear cells in a coculture with SaOS-2 cells transfected with the parathyroid hormone (PTH)/PTH- related protein receptor gene." Endocrinology. 140. 925-932 (1999)

    • Related Report
      1998 Annual Research Report
  • [Publications] Matsuzaki,K.,et al.: "Osteoclast differentiation factor (ODF) induces osteoclast-like cell formation in human peripheral blood mononuclear cell cultures." Biochem.Biophys.Res.Commun.246. 199-204 (1998)

    • Related Report
      1998 Annual Research Report
  • [Publications] Yasuda,H.,et al.: "Osteoclast differentiation factor is a ligand for osteoprotegerin/osteoclastogenesis-inhibitory factor and identical to TRANCE/RANKL." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 95. 3597-3602 (1998)

    • Related Report
      1998 Annual Research Report
  • [Publications] Nakamura,I.,et al.: "Src-dependent tyrosine phosphorylation of p130^<Cas> is required for actin ring formation in osteoclasts." J.Biol.Chem.273. 11144-11149 (1998)

    • Related Report
      1998 Annual Research Report
  • [Publications] Isogai,Y.,et al.: "Parathyroid hormone regulates osteoblast differentiation positively or negatively depending on the diffrentiation stages." J.Bone Miner.Res.11. 1384-1393 (1996)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] Jimi,E.,et al.: "Osteoclast function is activated by osteoblastic cells through a mechanism involving cell-to-cell contact." Endocrinology. 137. 2187-2190 (1996)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] Nakamura,I.,et al.: "Lack of vacuolar proton ATPase association with the cytoskeleton in osteoclasts of osteosclerotic (oc/oc) mice." FEBS Lett.401. 207-212 (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] Suda,T.,et al.: "Regulation of osteoclast function." J.Bone Miner.Res.12. 869-879 (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] Ishizuya,T.,et al.: "Parathyroid hormone experts disparate effects on osteoblast differntiation depending on exposure time in rat osteoblastic cells." J.Clin.Invest.99. 2961-2970 (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report
  • [Publications] kawasaki,K.,et al.: "Osteoclasts are present in gp 130-deficient mice." Endocrinology. 138. 4959-4965 (1997)

    • Related Report
      1997 Annual Research Report

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Published: 1997-04-01   Modified: 2016-04-21  

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