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強いATPの血清アルプミンへの吸着の生理的意義は何か

Research Project

Project/Area Number 09877422
Research Category

Grant-in-Aid for Exploratory Research

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Physical pharmacy
Research InstitutionHokkaido University

Principal Investigator

加茂 直樹  北海道大学, 大学院薬学研究科, 教授 (10001976)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 宮内 正二  北海道大学, 大学院薬学研究科, 助教授 (30202352)
Project Period (FY) 1997 – 1998
Project Status Completed (Fiscal Year 1998)
Budget Amount *help
¥1,600,000 (Direct Cost: ¥1,600,000)
Fiscal Year 1998: ¥800,000 (Direct Cost: ¥800,000)
Fiscal Year 1997: ¥800,000 (Direct Cost: ¥800,000)
Keywordsアルプミン / ATP / NMR / 滴定型カロリメトリー / 吸着 / 熱力学量の変化 / photo-affinity labeling / BSA / nucleotideの結合阻害 / リン酸の結合阻害 / ワルファリン / Clイオンの結合 / 脂肪酸 / Scatchardプロット
Research Abstract

アルブミンはATPとは相互作用をしない「不活性」なタンパクと考えられている.しかし,ATP依存系やATPase活性が血清アルブミンの存在によって影響を受けることが報告されている.ATPが血清アルブミンに吸着することを限外ろ過法およびNMRにより示した.pH依存性,イオン強度依存性について詳細な検討を加えた.NMRのデータから,ATPのどの部分がタンパクと相互作用しているかを明らかにした.滴定型カロリメトリーを用いて,吸着におけるΔH^○,ΔG^○,ΔS^○を5℃〜35℃で求め,吸着の熱力学的性質について検討した.photo-affinity labelingによって,ATPのアルブミンの吸着部位を推定した.3種類のラベル剤を合成し,8-N_3-εATPが最適であることを見いだした.このラベル剤を用いてATPの結合部位はサイトIの近傍であることを明らかにした.サイトI結合物質がATPのアルブミンへの結合をnon-competitiveに阻害することは,この結論を支持する.photo-affinityの実験データの詳細な検討により,2カ所の吸着部位が推定されたが,結合実験からは結合部位数は1であり,一見矛盾する結果となるが,2カ所の吸着部位が直列的につながっていると推定し,報告されているアルブミンの結晶構造から,この推定は妥当であると推論した.この吸着部位の内の1つは,Clの結合部位であることを明らかにした.

Report

(2 results)
  • 1998 Annual Research Report
  • 1997 Annual Research Report
  • Research Products

    (8 results)

All Other

All Publications (8 results)

  • [Publications] S.Takedaら他3名: "Adenosine 5′-triphosphate binding to bovine serum albumin" Biophys. Chem.69. 175-183 (1997)

    • Related Report
      1998 Annual Research Report
  • [Publications] H.Abeら他5名: "Factors affecting M13 bacteriophage inactivation by methtylene blue photosensitization" Photochem. Photobiol.65. 873-876 (1997)

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      1998 Annual Research Report
  • [Publications] H.Abeら他5名: "Potential involvement of both type 1 and type 2 mechanisms in M13 virus inactivation by methylene blue photosensitization." Photochem. Photobiol.66. 204-208 (1997)

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      1998 Annual Research Report
  • [Publications] J.Hirayamaら他6名: "Virus inactivation in superoxide dismutase preparations by ultraviolet light irradiation" Biol. Pharm. Bull.21. 621-624 (1998)

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      1998 Annual Research Report
  • [Publications] H.Abeら他5名: "Conjugation of dipeptide to fluorescent dyes enhances its affinity for a dipeptide transporter (PEPT1) in human intestinal Caco-2 cells" Bioconjugate Chem.10. 24-31 (1999)

    • Related Report
      1998 Annual Research Report
  • [Publications] S.Takeda, 他3名: "Adenosine 5′-triphosphate binding to bovine serum albumin" Biophys.Chem.69. 175-183 (1997)

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      1997 Annual Research Report
  • [Publications] S.Kurosawa, 他3名: "Dose response of solid phase radioimmunoassay to human IgG onto plasma-polymerized films coated with F(ab′)2 anti-human IgG antibody" Materials Sci.& Engineering. C4. 291-296 (1997)

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      1997 Annual Research Report
  • [Publications] S.Kurosawa, 他2名: "Detection of mutagenic polycyclic compounds using quartz crystal micro-balance coated with plasma-polymerized phthalocyanine derivatives" Anal.Chim.Acta. 337. 1-3 (1997)

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      1997 Annual Research Report

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Published: 1997-04-01   Modified: 2016-04-21  

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