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細胞核内に取込まれた低レベルβ線放出核種の細胞に与える影響

Research Project

Project/Area Number 09878105
Research Category

Grant-in-Aid for Exploratory Research

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field 環境影響評価(含放射線生物学)
Research InstitutionTokyo Medical and Dental University

Principal Investigator

矢野倉 美恵子  東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 教務職員 (50143615)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 寺岡 弘文  東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 助教授 (30019137)
Project Period (FY) 1997
Project Status Completed (Fiscal Year 1997)
Budget Amount *help
¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
Fiscal Year 1997: ¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
Keywordsβ線放出核種 / [^3H]チミジン / アポトーシス / DNA断片化 / 過酸化水素 / カタラーゼ
Research Abstract

1,[methyl-3H]Thymidine([^3H]-TdR)を培地に加え、DNAに^3Hを取込ませると、前骨髄性白血病細胞株HL-60やT細胞由来Molt-4においては、1〜2日後に10〜30%の^3HをDNA内に取込み、DNAラダーを伴う細胞死が認められた。また、T細胞由来Jurkatにおいては、^3HのDNAへの取り込みが2%以下と非常に少なかったが、4日目にはDNAラダーが観察された。これに対して、B細胞由来RajiやSKW6-CL4では、細胞死は認められたもののDNAラダーは観察されなかった。
2,HL-60やMolt-4のアポトーシスでは、Caspase-3の活性化及びCaspase-3前駆体の切断が見られ、Caspase-3の基質と言われているDNA依存性プロテインキナーゼ及びポリ(ADPリポ-ス)ポリメラーゼの切断もあわせて認められた。また、Bcl-2及びBadのタンパクレベルに変化は見られず、Baxは減少した。
3,Molt-4においては、DNAラダーはCaspase-3の阻害剤によって抑制されたが、Caspase-1の阻害剤によっては抑制されなかった。
4,HL-60の変異株HP50-2、HP100-1は過酸化水素抵抗性の細胞株で、それぞれ3倍、18倍のカタラーゼ活性を発現している。これらの細胞に[^3H]-TdRを取り込ませると、いずれも同程度に核内のDNAに^3Hを取込むが、カタラーゼ活性の高い細胞株ほど生存率が高く、HP100-1ではDNAラダーの出現の遅れが観察された。
5,蛍光プローブを用い、[^3H]-TdRの取込みによる細胞内のヒドロペルオキドの生成を蛍光顕微鏡によって観察した。この結果、HL-60やHP50-2ではHP100-1に比べ、強い蛍光を発する縮小した細胞がより多く見られた。

Report

(1 results)
  • 1997 Annual Research Report

URL: 

Published: 1997-04-01   Modified: 2016-04-21  

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