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単一運動ニューロンcDNA比較による軸索ガイダンス分子の単離と機能解析

Research Project

Project/Area Number 09878182
Research Category

Grant-in-Aid for Exploratory Research

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Neurochemistry/Neuropharmacology
Research Institution大分医科大学

Principal Investigator

調 恒明  大分医科大学, 医学部, 助教授 (50179058)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 松尾 哲孝  大分医科大学, 医学部, 助手 (10284788)
Project Period (FY) 1997 – 1998
Project Status Completed (Fiscal Year 1998)
Budget Amount *help
¥1,700,000 (Direct Cost: ¥1,700,000)
Fiscal Year 1998: ¥800,000 (Direct Cost: ¥800,000)
Fiscal Year 1997: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
Keywords運動ニューロン / 神経回路形成 / サブトラクション
Research Abstract

運動ニューロンの軸索ガイダンスに関わるcDNAを単離することを目的として、サブトラクションクローニングを行い、これまでに以下の結果を得た。
1. 方法
ニワトリ4.5日胚から、胸部、および腰部脊髄を別々に単離し、パンニング法により運動ニューロンを精製し、ここからmRNAを調製した。cDNAに変換した後、制限酵素処理し、両端にリンカーをつけ、このリンカーを用いてPCR法により増幅した。腰部運動ニューロンcDNAから、胸部運動ニューロンcDNAをビオチンアビジン法を用いて差し引き、さらにこの一部をシークエンスゲル上にdisplayし、特異的発現を示す断片を単離した。これをベクターに繋ぎ、塩基配列を決定しデータベースを照合して、配列の相同性を調べた。
2. 結果
1つはごく最近クローニングされたショウジョウバエRoundabout(Robo)遺伝子のニワトリホモログであることが判明した。Roboは、神経軸索先端の成長円錐に特異的に発現し、正中線を越えるプロセスを制御している新たな受容体分子として、University of Ca1iforniaのCorey GoodmanらによりCellに報告された。Roboのin situ hybridizationを行い、運動ニューロン、体節に発現していることを明らかにした。この分子のニワトリ運動ニューロンにおける機能を明らかにしたいと考えている。またその他の分子については現在、探索を続けている。

Report

(2 results)
  • 1998 Annual Research Report
  • 1997 Annual Research Report
  • Research Products

    (10 results)

All Other

All Publications (10 results)

  • [Publications] 田中英明: "Commitment of motoneuron progenitors of chick embryo along the anterior-posterior axis" Developmental Neuroscience. 19. 106-111 (1997)

    • Related Report
      1998 Annual Research Report
  • [Publications] 杜 敏杰: "Identification of alternative fisrt exons of NADH-cytochrome b5 reductase gene expressed ubiquitously in human cells" Biochem.Biophys.Res.Commun.235. 779-783 (1997)

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      1998 Annual Research Report
  • [Publications] 河野昌也: "Role of carboxyl residues surrounding heme of human cytochrome b5 in the electrostatic interaction with NADH-cytochrome b5 reductase" Biochem.Biophys.Res.Commun.245. 666-669 (1998)

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      1998 Annual Research Report
  • [Publications] 調 恒明: "神経軸索はどのようにして標的細胞に到達するか" 脳の科学. 20. 1281-1286 (1998)

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      1998 Annual Research Report
  • [Publications] 調 恒明: "Electrostatic interaction between NADH-cytochrome b5 reductase and cytochrome b5 studied by site-directed mutagenesis" Biochim.Biophys.Acta. 1384. 16-22 (1998)

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      1998 Annual Research Report
  • [Publications] 田中英明: "Commitment of motoneuron progenitors of chick embryo along the anterior-posterior axis" Developmental Neuroscience. 19. 106-111 (1997)

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      1997 Annual Research Report
  • [Publications] 竹下正純: "Lack of promotion of colon carcinogenesis by high-oleic safflower oil" Cancer. 79. 1487-1493 (1997)

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      1997 Annual Research Report
  • [Publications] 吉田 敏: "Analyses by Fourier transform infrared spectroscopies of protein structures of soluble NADH-cytochrome b5 reductases prepared by site-directed mutagenesis:Comparison with ferredoxin-NADP+reductase" Biospectroscopy. 3. 215-223 (1997)

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      1997 Annual Research Report
  • [Publications] 杜 敏杰: "Identification of alternative first exons of NADH-cytochrome b5 reductase gene expressed ubiquitously in human cells" Biochem. Biophys. Res. Com.235. 779-783 (1997)

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      1997 Annual Research Report
  • [Publications] 調 恒明: "Electrostatic interaction between NADH-cytochrome b5 reductase and cytochrome b5 studied by site-directed mutagenesis" Biochim. Biophys. Acta. (in press).

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      1997 Annual Research Report

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Published: 1997-04-01   Modified: 2016-04-21  

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