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バベシア原虫感染に対する宿主防御免疫機構の解明と新規ワクチンの開発

Research Project

Project/Area Number 09F09338
Research Category

Grant-in-Aid for JSPS Fellows

Allocation TypeSingle-year Grants
Section外国
Research Field Applied veterinary science
Research InstitutionObihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine

Principal Investigator

西川 義文 (2010-2011)  国立大学法人帯広畜産大学, 原虫病研究センター, 准教授

玄 学南 (2009)  Obihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine, 原虫病研究センター, 教授

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) TERKAWI M.H.  国立大学法人帯広畜産大学, 原虫病研究センター, 外国人特別研究員
TERKAWI M.H  国立大学法人帯広畜産大学, 原虫病研究センター, 外国人特別研究員
Project Period (FY) 2009 – 2011
Project Status Completed (Fiscal Year 2011)
Budget Amount *help
¥2,400,000 (Direct Cost: ¥2,400,000)
Fiscal Year 2011: ¥800,000 (Direct Cost: ¥800,000)
Fiscal Year 2010: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
Fiscal Year 2009: ¥700,000 (Direct Cost: ¥700,000)
KeywordsBabesia microti / 宿主防御免疫 / NK細胞 / マクロファージ / 組換えワクチン / BmAMA1 / 防御免疫 / cDNAライブラリー / イムノスクリーニング / Babesia rodhaini / 分泌抗原 / 交差反応抗原
Research Abstract

本研究は、新興人獣共通感染症の原因原虫でもあるネズミバベシア原虫(バベシア原虫属の実験モデル原虫として知られる)に焦点を当て、宿主防御免疫機構の解明と新規組換えワクチン開発を目指して企画した。本年度に実施した研究内容と得られた研究成果は以下の通りである。
宿主防御免疫機構の解明:1)NK細胞の解析。BALB/cマウスにNK特異抗体(anti-asialo GMI抗体)を頻回投与したところ、NK細胞の特異的欠損が認められた。NK細胞欠損(処置群)と非欠損(非処置群)マウスにそれぞれネズミバベシア原虫(B.microti)を感染させたところ、感染初期においては処置群の方が非処置群と比べ感受性が高い結果が得られた。これらの結果より、NK細胞がネズミバベシア原虫感染において少なくとも感染初期においては宿主の防御免疫に関わっていることが示唆された。2)マクロファージ細胞の解析。BALB/cマウスにCondronate liposmeを投与したところ、体マクロファージ細胞の特異的欠損が認められた。マクロファージ欠損(処置群)と非欠損(非処置群)マウスにネズミバベシア原虫を感染させたところ、感染初期・中期・後期に渡り、処置群の方が非処置群と比べ感受性が顕著に高い結果が得られた。これらの結果より、マクロファージ細胞はネズミバベシア原虫感染において中心的な感染防御免疫担当細胞であることが強く示唆された。
ワクチン候補分子の探索:ネズミバベシア原虫と進化的に近縁な多くの原虫でワクチン候補の一つとして知られているApical Membrane Antigen1(AMA1)の同定とクローニングを試みた。他の近縁原虫で保存されている領域にプライマーを設計し、デジェネレートPCR法にて標的遺伝子の増幅を行ったところ、B.microti由来のAMA1遺伝子(BmAMA1)の同定に成功した。BmAMA1遺伝子を大腸菌で発現し組換えBmAMA1タンパク質を作出した。また、組み換えBmAMA1タンパク質をマウスに頻回免疫し、特異抗血清を作出した。この血清を用いて、虫体におけるBmAMA1タンパク質の同定に成功した。

Report

(3 results)
  • 2011 Annual Research Report
  • 2010 Annual Research Report
  • 2009 Annual Research Report
  • Research Products

    (11 results)

All 2012 2011 2010 2009 Other

All Journal Article (6 results) (of which Peer Reviewed: 6 results) Presentation (2 results) Remarks (3 results)

  • [Journal Article] Macrophages are critical for cross-protective immunity conferred by Babesia microti against Babesia rodhaini infection in mice2012

    • Author(s)
      Li, et al
    • Journal Title

      Infect.Immun.

      Volume: 80 Issue: 1 Pages: 311-320

    • DOI

      10.1128/iai.05900-11

    • Related Report
      2011 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Molecular and immunological characterization of a novel 32-kilodalton secreted protein of Babesia microti2012

    • Author(s)
      Ooka, et al
    • Journal Title

      J.Parasitol.

      Volume: 98(印刷中) Issue: 5 Pages: 1045-1048

    • DOI

      10.1645/ge-2999.1

    • Related Report
      2011 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] A double antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay for detection of secreted antigen 1 of Babesia microti using hamster model.130: 178-182, 20122012

    • Author(s)
      Luo, et al
    • Journal Title

      Exp.Parasitol.

      Volume: 130 Issue: 2 Pages: 178-182

    • DOI

      10.1016/j.exppara.2011.10.012

    • Related Report
      2011 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Babesia microti: Molecular and antigenic characterizations of a novel 94-kilodalton protein (BmP94).2011

    • Author(s)
      Ooka, et al.
    • Journal Title

      Exp.Parasitol.

      Volume: 127 Pages: 287-293

    • Related Report
      2010 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Identification and characterization of a novel secreted antigen 1 of Babesia microti and evaluation of its potential use in enzyme-linked immunosorbent assay and immunochromatographic test.2011

    • Author(s)
      Luo, et al.
    • Journal Title

      Parasitol.Int.

      Volume: 60 Pages: 119-125

    • Related Report
      2010 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Molecular and immunological characterization of Babesia gibsoni and B.microti heat shock protein-70.2009

    • Author(s)
      Terkawi, et al.
    • Journal Title

      Parasite Immunol. 31

      Pages: 328-340

    • Related Report
      2009 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 非致死性Babesia microtiに感染したマウスでは致死性Babesia rodhaini感染への防御免疫が誘導される2010

    • Author(s)
      李艶, ら
    • Organizer
      第149回日本獣医学会
    • Place of Presentation
      日本獣医生命科学大学
    • Year and Date
      2010-03-27
    • Related Report
      2009 Annual Research Report
  • [Presentation] Babesia microtiの新規分泌抗原BmSA1の同定と診断抗原としての応用2010

    • Author(s)
      羅玉子, ら
    • Organizer
      第149回日本獣医学会
    • Place of Presentation
      日本獣医生命科学大学
    • Year and Date
      2010-03-27
    • Related Report
      2009 Annual Research Report
  • [Remarks]

    • URL

      http://www.obihiro.ac.jp/~geneticbiochem/

    • Related Report
      2011 Annual Research Report
  • [Remarks]

    • URL

      http://www.obihiro.ac.jp/~geneticbiochem/

    • Related Report
      2010 Annual Research Report
  • [Remarks]

    • URL

      http://www.obihiro.ac.jp./~geneticbiochem/

    • Related Report
      2009 Annual Research Report

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Published: 2009-04-01   Modified: 2024-03-26  

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