RNAウイルスの複製精度制御機構の解明と新規な防御ウイルス創成戦略の構築

• Project/Area Number: 09J08404
• Research Category: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• Allocation Type: Single-year Grants
• Section: 国内
• Research Field: Applied molecular and cellular biology
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 小松 健 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 特別研究員(PD)
• Project Period (FY): 2009 – 2011
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2011)
• Budget Amount: ¥3,400,000 (Direct Cost: ¥3,400,000); Fiscal Year 2011: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000); Fiscal Year 2010: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000); Fiscal Year 2009: ¥1,400,000 (Direct Cost: ¥1,400,000)
• Keywords: ウイルス / 複製精度

Research Abstract

本年度は、オオバコモザイクウイルス(PlAMV)の複製精度に大きな影響を及ぼすと考えられる、PlAMVが引き起こす全身壊死(systemic necrosis)について解析を行った。PlAMVにコードされるタンパク質を、全身壊死を引き起こす宿主であるタバコ属のモデル植物Nicotiana benthamianaにおいてアグロインフィルトレーション法により一過的に発現させたところ、複製酵素が壊死を誘導することがわかった。細胞間移行タンパク質など他のタンパク質は壊死に影響を及ぼさなかった。また、誘導発現系を用いて複製酵素と壊死の関係についてさらに解析した結果、複製酵素の蓄積量が多いほど、壊死が強く誘導されることが示された。さらに、複製酵素における壊死誘導活性を持つ領域を絞り込んだ結果、複製酵素の中央部に位置するヘリカーゼドメインが壊死誘導活性を持つことを明らかにした。さらに、ヘリカーゼドメインによる壊死誘導活性は、無病徴の分離株にも見出されることは、上記の結果とあわせて、無病徴の分離株も蓄積量によって壊死を誘導する可能性があることを示唆しており、ウイルスの複製精度の低さに起因するゲノムの多様性と、病原性の進化について考察する意味で非常に意義深い知見である。
さらに、PlAMVとは異なるRNAウイルスの感染植物内でのゲノムの多様性を比較するため、さまざまなRNAウイルスのゲノム塩基配列の解析を行った。特に、PlAMVと同様ひも状のウイルス粒子で単一の一本鎖RNAゲノムを持ち、ウメに大きな被害を及ぼすウメ輪紋ウイルス(plum pox virus:PPV)の日本における遺伝的多様性を示した研究成果は、ウイルスの伝播・発病と遺伝的多様性の関係を示す知見であり、植物RNAウイルスの複製精度の低さに起因する多様性がエマージングウイルスの与える被害に影響する可能性を示唆している意味で興味深い。

Research Products

• [Journal Article] Infection of capilloviruses requires subgenomic RNAs whose transcription is controlled by promoter-like sequences conserved among flexiviruses (2012)
  • Author(s): Komatsu K., Hirata H., Fukagawa T., Yamaji Y., Okano Y., Ishikawa K., Adachi T., Maejima K., Hashimoto M., Namba S.
  • Journal Title: Virus Research Volume: (印刷中) Issue: 1 Pages: 8-15
  • DOI: 10.1016/j.virusres.2012.02.019
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Lectin-mediated resistance impairs plant virus infection at the cellular level (2012)
  • Author(s): Yamaji Y., Maejima K., Komatsu K., Shiraishi T., Okano Y., Himeno M., Sugawara K., Neriya Y., Minato N., Miura C., Hashimoto M., Namba S.
  • Journal Title: Plant Cell Volume: 24 Issue: 2 Pages: 778-793
  • DOI: 10.1105/tpc.111.093658
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] First report of fig mosaic virus infecting common fig (Ficus carica) in Japan (2012)
  • Author(s): Ishikawa K., Maejima K., Nagashima S., Sawamura N., Takinami Y., Komatsu K., Hashimoto M., Yamaji Y., Yamamoto J., Namba S.
  • Journal Title: Journal of General Plant Pathology Volume: 78 Issue: 2 Pages: 136-139
  • DOI: 10.1007/s10327-012-0359-9
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Cloning, expression analysis and sequence diversity of genes encoding two different immunodominant membrane proteins in poinsettia branch-inducing phytoplasma (PoiBI) (2011)
  • Author(s): Neriya Y., Sugawara K., Maejima K., Hashimoto M., Komatsu K., Minato N., Miura C., Kakizawa S., Yamaji Y., Oshima K., Namba S.
  • Journal Title: FEMS Microbiology Letters Volume: 324 Issue: 1 Pages: 38-47
  • DOI: 10.1111/j.1574-6968.2011.02384.x
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] First report of Helleborus net necrosis virus isolated from hellebores with black death syndrome in Japan (2011)
  • Author(s): Shiraishi T., Hoshi H., Eimori K., Kawanishi T., Komatsu K., Hashimoto M., Maejima K., Yamaji Y., Namba S.
  • Journal Title: Journal of General Plant Pathology Volume: 77 Issue: 4 Pages: 269-272
  • DOI: 10.1007/s10327-011-0321-2
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] New detection systems of bacteria using highly selective media designed by SMART : Selective Medium-Design Algorithm Restricted by Two constraints (2011)
  • Author(s): Kawanishi T., Shiraishi T., Okano Y., Sugawara K., Hashimoto M., Maejima K., Komatsu K., Kakizawa S., Yamaji Y., Hamamoto H., Oshima K., Namba S.
  • Journal Title: PLoS ONE Volume: 6(1) Issue: 1 Pages: e16512-e16512
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0016512
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] A necrosis-inducing elicitor domain encoded by both symptomatic and asymptomatic Plantago asiatica mosaic virus isolates, whose expression is modulated by virus replication (2011)
  • Author(s): Komatsu K., Hashimoto M., Maejima K., Shiraishi T., Neriya Y., Miura C., Minato N., Okano Y., Sugawara K., Yamaji Y., Namba S.
  • Journal Title: Molecular Plant-Microbe Interactions Volume: 24 Issue: 4 Pages: 408-420
  • DOI: 10.1094/mpmi-12-10-0279
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Molecular epidemiology of plum pox virus in Japan (2011)
  • Author(s): Maejima K., Himeno M., Komatsu K., Takinami Y., Hashimoto M., Takahashi S., Yamaji Y., Oshima K., Namba S.
  • Journal Title: Phytopathology Volume: 101 Issue: 5 Pages: 408-420
  • DOI: 10.1094/phyto-10-10-0280
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] First report of plum pox virus infecting Japanese apricot (Prunus mume Sieb. et Zucc.) in Japan. (2010)
  • Author(s): Maejima K., Hoshi, H., Hashimoto M., Himeno, M., Kawanishi, T., Komatsu K., Yamaji Y., Hamamoto, H., Namba S.
  • Journal Title: Journal of General Plant Pathology Volume: 76 Pages: 229-231
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Pseudo-polyprotein translated from the full-length ORF1 of capillovirus is important for pathogenicity, but a truncated ORF1 protein without variable and CP regions is sufficient for replication. (2010)
  • Author(s): Hirata, H., Yamaji, Y., Komatsu K., Kagiwada, S., Oshima, K., Okano, Y., Takahashi, S., Ugaki, M., Namba S.
  • Journal Title: Virus Research Volume: 152 Pages: 1-9
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Genetic heterogeneity found in the replicase of poinsettia mosaic virus isolates. (2010)
  • Author(s): Okano, Y., Maejima, K., Shiraishi, T., Hashimoto, M., Senshu, H., Ozeki, J., Takahashi, S., Komatsu K., Yamaji, Y., Namba S.
  • Journal Title: Archives of Virology Volume: 155 Pages: 1367-1370
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Significantly low level of small RNA accumulation derived from an encapsidated mycovirus with dsRNA genome. (2010)
  • Author(s): Himeno, M., Maejima, K., Komatsu, K., Ozeki, J., Hashimoto, M., Kagiwada, S., Yamaji, Y., Namba, S.
  • Journal Title: Virology 396 Pages: 69-75
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Viral-induced systemic necrosis in plants involves both programmed cell death and the inhibition of viral multiplication, which are regulated by independent pathways. (2010)
  • Author(s): Komatsu K., Hashimoto M., Ozeki J., Yamaji Y., Maejima K., Senshu, H., Himeno, M., Okano, Y., Kagiwada S., Namba S.
  • Journal Title: Molecular Plant-Microbe Interactions 23 Pages: 283-293
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Complete nucleotide sequence and genome organization of butterbur mosaic virus. (2009)
  • Author(s): Hashimoto M., Komatsu K., Maejima K., Ozeki J., Kagiwada S., Takahashi S., Yamaji Y., Namba S.
  • Journal Title: Archives of Virology 154 Pages: 1955-1958
  • Peer Reviewed
• [Presentation] Plantago asiatica mosaic virus (PlAMV)無病徴型分離株のヘリガーゼドメインには壊死誘導活性がある (2012)
  • Author(s): 小松健・石川一也・足立達司・白石拓也・橋本将典・山次康幸・難波成任
  • Organizer: 平成24年度日本植物病理学会大会
  • Place of Presentation: 福岡国際会議場
  • Year and Date: 2012-03-29
• [Presentation] Plantago asiatica mosaic virus(PlAMV)によりNicotiana benthamianaに誘導される壊死病徴の決定機構 (2011)
  • Author(s): 小松健・湊菜未・煉谷裕太朗・白石拓也・足立達司・難波成任
  • Organizer: 平成23年度日本植物病理学会大会
  • Place of Presentation: 東京農工大学府中キャンパス
  • Year and Date: 2011-03-29