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糖脂質による細胞表層シグナル伝達タンパク質の配向の制御

Research Project

Project/Area Number 10134234
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research InstitutionNihon University

Principal Investigator

横山 三紀  日本大学, 松戸歯学部, 講師 (70191533)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 横山 茂之  東京大学, 理学部, 教授 (00159229)
Project Period (FY) 1998
Project Status Completed (Fiscal Year 1998)
Budget Amount *help
¥1,400,000 (Direct Cost: ¥1,400,000)
Fiscal Year 1998: ¥1,400,000 (Direct Cost: ¥1,400,000)
Keywordsガングリオシド / NAD / CD38 / エクト型酵素 / 細胞膜 / シグナル伝達
Research Abstract

平成9年度においてはNAD分解酵素であるリンパ球表面抗原CD38を用いて、この膜貫通タンパク質とガングリオシドとの相互作用を細胞レベルで解析した。その結果、細胞の表面においても糖鎖構造に依存してガングリオシドとCD38が相互作用することを明らかにした。そこで平成10年度においてはガングリオシドにより[1]CD38と他のタンパク質分子との相互作用が変化するか否か、[2]CD38の膜上での挙動が変化するか否か、の2点を検討した。また相互作用を分子レベルで解明するために平成9年度に引き続きCD38とガングリオシドとの結晶化の検討を行った。[1]HL60細胞に抗CD38モノクローナル抗体を作用させると細胞内のタンパク質(cbl,HS-1,syk)のチロシン残基がリン酸化される。この反応は抗CD38モノクローナル抗体のFc部分がIgG-Fcレセプター(FcγR)に作用するためである。(a)抗CD38モノクローナル抗体を作用させた場合のチロシンリン酸化反応にはGT1bによる顕著な差異は認められなかった。このことからGT1bはCD38と抗CD38モノクローナル抗体との相互作用には影響を与えないことが強く示唆された。(b)GT1bはRA-HL60細胞のFcγRの架橋刺激に対する応答性を変化させた。現在GT1bの効果がFcγRに対する直接のものか、CD38を介したものかであるかをさらに検討中である。[2]RA-HL60細胞を1%Triton X100により可溶化した後、ショ糖密度勾配超遠心の方法を用いてマイクロドメインを分離した。抗CD38モノクローナル抗体の刺激によりCD38のマイクロドメインへの移行が促進された。刺激時のマイクロドメインへの局在はGT1b処理により影響を受けなかったが、非刺激時のCD38のマイクロドメインへの局在はGT1b処理により解除された。

Report

(1 results)
  • 1998 Annual Research Report
  • Research Products

    (4 results)

All Other

All Publications (4 results)

  • [Publications] Yoko Dohke et al.: "ADP-RIBOSYLATION FACTORS IN RAT PAROTID ACINAR CELLS" European Journal of Morphology. 36. 186-189 (1998)

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  • [Publications] Yoko Dohke et al.: "Translocation of Arfl to the Secretory Granules in Rat Parotid Acinar Cells" ARCHIVES OF BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS. 357(1). 147-154 (1998)

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      1998 Annual Research Report
  • [Publications] Junko Fujita-Yoshigaki et al.: "SNARE PROTEINS FOR CYCLIC AMP-REGULATED EXOCYTOSIS IN SALIVARY GLANDS" European Journal of Morphology. 36. 46-49 (1998)

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      1998 Annual Research Report
  • [Publications] Hiromi Michikawa et al.: "cGMP production is coupled to Ca^<2+>-dependent nitric oxide generation in rabbit parotid acinar cells" Cell Calcium. 23(6). 405-412 (1998)

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      1998 Annual Research Report

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Published: 1998-04-01   Modified: 2016-04-21  

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