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重金属を選択的にターゲティングするタンパク質分子のデザイン

Research Project

Project/Area Number 10145108
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research InstitutionOsaka University

Principal Investigator

室岡 義勝  大阪大学, 大学院・工学研究科, 教授 (60029882)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 平山 令明  東海大学, 開発工学部, 教授 (70238393)
小野 比佐好  大阪大学, 遺伝情報実験施設, 助手 (40224274)
Project Period (FY) 1994 – 1998
Project Status Completed (Fiscal Year 1998)
Budget Amount *help
¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
Fiscal Year 1998: ¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
Keywords重金属 / メタロチオネイン / タンパク質工学 / SH基高含有タンパク質 / 重金属結合タンパク質
Research Abstract

生体内の重金属を結合するSH基高含有タンパク質をタンパク質工学的にデザインし直し、アミノ酸配列を人工的に改変して、特定の重金属を識別する金属タンパク質を創製し、重金属解毒や医療医薬または環境中の重金属モニターや集積除去に関わる新素材機能の開発を目的とし、ヒト由来の重金属結合タンパク質メタロチオネインを立体構造と金属結合機能解析のモデルに下記の研究を行った。
1. 大腸菌による重金属結合タンパク質の生産系の開発:
GST-hMT-II融合法によって、ヒトメタロチオネインおよびその変異タンパク質を大腸菌で大量発現させることができた。
2. 重金属結合タンパク質の発現生産効率評価のための簡易測定法の開発:
大腸菌で大量生産したメタロチオネインタンパク質の可溶化条件を検討し、可溶化の後、FactorXで切断して、メタロチオネインタンパク質の精製条件を確立した。現在、米国ハーバードメディカルスクールにおいて、野生と変異タンパク質の生化学的諸性質を解析中である。
3. 三次構造モデルの構築と重金属特異的結合能を有するタンパク質の開発:
三次構造モデルを構築し、コンピューターでディスプレイできるソフトを開発した。

Report

(1 results)
  • 1998 Annual Research Report
  • Research Products

    (8 results)

All Other

All Publications (8 results)

  • [Publications] Naoto Yoshida: "Heavy metal-binding protein from Thiobacillus intermedius and adsorption of the cells to crystal particles of heavy metals." Recent Res.Devel.In Fermentation & Bioeng.1. 1-8 (1998)

    • Related Report
      1998 Annual Research Report
  • [Publications] Naoto Yoshida: "Heavy metal particle resistance in Thiobacillus intermedius 13-I isolated from corroded concrete" Journal of Fermentation and Bioengineering. 85(6). 630-633 (1998)

    • Related Report
      1998 Annual Research Report
  • [Publications] Y.Nishiya: "Effect of non-ionic detergents on apparent enzyme mechanism : V121A mutant of Streptomvces cholesterol oxidase endowed with enhanced sensitivity against detergents." Protein Engineering. 11(8). 609-611 (1998)

    • Related Report
      1998 Annual Research Report
  • [Publications] Mitsuo Yamashita: "Separation of the two reactions,oxidation and isomerization,catalyzed by Streptomyces cholesterol oxidase" Protein Engineering. 11(11). 1075-1081 (1998)

    • Related Report
      1998 Annual Research Report
  • [Publications] H.-J.Cho: "Agrobacterium rhizogenes-mediated transformation and regeneration of the legume Astragalus sinicus(Chinese milk vetch)." Plant Science. 138(1). 53-65 (1998)

    • Related Report
      1998 Annual Research Report
  • [Publications] Hisayo Ono: "Characterization of biosynthetic enzymes for ectoine as a compatible solute in a moderately halophilic eubacteria.Halomonas elongata." Journal of Bacteriology. 181(1). 91-99 (1999)

    • Related Report
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  • [Publications] Yoshikatsu Murooka: "Biological Nitrogen Fixation for the 21^<st> Century" eds.C.Elmerich.et al.,Kluwer Academic Publishers.London, 708 (1998)

    • Related Report
      1998 Annual Research Report
  • [Publications] Yoshikatsu Murooka: "Progress in Biotechnology Vol.15.Stability and Stabilization of Biocatalysts" eds.A.Ballesteros,et al.,Elsevier.Amsterdam, 757 (1998)

    • Related Report
      1998 Annual Research Report

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Published: 1998-04-01   Modified: 2016-04-21  

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