センサー機能分子の導入による外部環境応答性タンパク質の分子デザイン

Research Project

Project/Area Number	10145245
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
Allocation Type	Single-year Grants
Research Institution	Kyushu University
Principal Investigator	浜地格九州大学, 工学部, 助教授 (90202259)
Project Period (FY)	1998
Project Status	Completed (Fiscal Year 1998)
Budget Amount *help	¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000) Fiscal Year 1998: ¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
Keywords	イシノニ酢酸 / 半合成リボタクレアーゼ / 活性スイッチング / 金属イオン応答性
Research Abstract	(1) 遷移金属イオン結合能をもったイミノ二酢酸型アミノ酸をリジンを基本骨格として大量合成するルートを確立した。またこれにFmo保護基をつけて、ペプチド自動合成器を使ってペプチド内に自動で組込むことができることを確認した。 (2) 次いで、リボタクレアーゼSのペプチド部分に上記イミノ二酢酸を導入した人工S-ペプチドを半合成によって組み込んだ。導入位置によって半合成がうまくいく場合とそうでない場合が見られたが、溶媒側に露出した残基には、うまく導入できた。得られた半合成リボタクレアーゼについて、金属イオンを添加して、構造と活性の変化を追跡すると、モノ置換体では、銅イオンの添加によって活性が抑制された。一方、ジ置換体では、i,i+4への位置にイミノ二酢酸を導入した場合には、この残基間での協同的な錯体形成によって酵素が安定化され、活性が上昇した。 (3) これらの応答性を利用して、活性のスイッチングが銅イオンの濃度によって可能な、リボタクレアーゼが半合成された。