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真核生物におけるDNA複製複合体の分子構築と機能解析

Research Project

Project/Area Number 10162208
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research InstitutionOsaka University

Principal Investigator

野島 博  大阪大学, 微生物病研究会, 教授 (30156195)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 木村 真也  大阪大学, 微生物病研究所, 教務職員 (70273703)
鍋島 健太郎  大阪大学, 微生物病研究所, 助手 (60294120)
田中 誠司  大阪大学, 微生物病研究所, 助手 (50263314)
Project Period (FY) 1998
Project Status Completed (Fiscal Year 1998)
Budget Amount *help
¥2,500,000 (Direct Cost: ¥2,500,000)
Fiscal Year 1998: ¥2,500,000 (Direct Cost: ¥2,500,000)
KeywordsRfc3 / DNA複製開始 / Nik1 / 蛋白質キナーゼ / チェックポイント / Mcm蛋白質 / E2F
Research Abstract

酵母および哺乳動物細胞を用いて真核生物におけるDNA複製複合体の分子構築とその作用機序を解明するために、以下の4つの方向から研究を進めてきた。1.分裂酵母のRfc3:我々が最近開発に成功した重差分化法という新たな技術を用いて数多くクローン化した分裂酵母の減数分裂前DNA合成開始制御に関わる遺伝子群の中に、出芽酵母のReplication Factor Cの3番目のサブユニット(Rfc3)に酷似した構造を持つ遺伝子が見つかった。その機能解析をした結果、この遺伝子はmitosisにおけるDNA複製に重要な働きをしているRfc3そのものであることが示唆された。このRfcはDNA複製のみでなく、DNA複製チェックポイントやDNA傷害チェックポイントにも密接に絡んでいることが分かったので、それらの点について詳しく解析した。2.哺乳動物細胞E2FのS期開始制御機構:哺乳動物細胞のG1/S期での転写誘導に重要な役割を果たすE2F蛋白質について、その制御機構を解析した。特にDNA複製開始制御に関わるHsMCM遺伝子の転写制御機構を詳しく解析した。3.哺乳動物のMCM/Pl蛋白質:哺乳動物細胞のDNA複製開始制御に関わる碓類のHsMcm2-7蛋白質に対して作製した抗体や、バキュロウイルス系を用いて純化したHsMCM蛋白質を用いて、免沈や電顕などによりHsMcm2-7複合体全体の構造と機能を解析した。4.出芽酵母のNiklのS期開始制御:発現がG1/S期でピークを持つ細胞周期性振動を繰り返すNIKIは、G2/M期遷移の制御のみでなく、S期開始制御も行うことを我々は新たに見出したので、その分子制御機構を詳しく解析した。

Report

(1 results)
  • 1998 Annual Research Report
  • Research Products

    (5 results)

All Other

All Publications (5 results)

  • [Publications] Ito,A.,et al.: "Granzyme B is a transcriptional target of MITF in murine mast cells." Blood. 91. 3210-3221 (1998)

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  • [Publications] Kobori M.,er al.: "Large scale isolation of osteoclast-specific genes by an improved method involving the preparation of a subtracted cDNA library." Genes to Cells. 3. 459-475 (1998)

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  • [Publications] Tsubota,Y.,et al.: "Negative regulation of the rat cdc2 promoter in G1 by the silencer element." Cell Growth Diff.9. 257-265 (1998)

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  • [Publications] Suzuki,M.,et al.: "A novel E2F binding protein with Myc-type HLH motif stimulates E2F-dependent transcription by forming a heterodimer." Oncogene. 17. 853-865 (1998)

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  • [Publications] Ohtani,K.,et al.: "Cell-growth-regulated expression of mammalian MCM5 and MCM6 genes mediated by the transcription factor E2F." Oncogene. (in press).

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Published: 1998-04-01   Modified: 2016-04-21  

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