転写因子WT1の造血幹細胞の増殖、分化の制御に果たす役割の解析

Research Project

Project/Area Number	10181214
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
Allocation Type	Single-year Grants
Review Section	Biological Sciences
Research Institution	Osaka University
Principal Investigator	杉山治夫大阪大学, 医学部, 教授 (70162906)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	尾路祐介大阪大学, 医学部, 助手 (20294100) 岡芳弘大阪大学, 医学部, 助手 (20273691)
Project Period (FY)	1998
Project Status	Completed (Fiscal Year 1998)
Budget Amount *help	¥2,400,000 (Direct Cost: ¥2,400,000) Fiscal Year 1998: ¥2,400,000 (Direct Cost: ¥2,400,000)
Keywords	WT1遺伝子 / G-CSF / 32D細胞 / Stat3 / 顆粒球系コロニー
Research Abstract	IL-3依存性に増殖するmyeloid progenitor cellである32D細胞は、G-CSFの刺激で完全に好中球まで分化するが、この32D細胞にWT1遺伝子を導入し、WT1を持続発現させたところ、G-CSF刺激による分化が抑制され、逆に、G-CSFの刺激によって増殖を始めた。G-CSFの刺激による増殖能は、導入したWT1遺伝子の発現量が高いものほど強く、増殖能と発現量は比例した。WT1遺伝子を高発現した細胞では、ベルオキシダーゼ遺伝子の発現がdown-regulationされず、分化が抑制されていることが示された。WT1遺伝子を発現して、G-CSFの刺激に反応して増殖している細胞では、Stat3α及びStat3βの両者の持続的な活性化が見られた。さらに、マウスの正常骨髄細胞に、レトロウイルスベクターを用いて、WT1遺伝子を導入し、WT1を持続発現させ、G-CSF存在下でコロニーアッセイを行ったところ、CFU-G,CFU-M;CFU-GMなどの顆粒球系コロニーの形成が、WT1遺伝子を導入していないコントロールに比し、著名に増加した。WT1遺伝子導入細胞とコントロールとのコロニー形成能の差は、G-CSF濃度が低い所(10ng/ml)で、最も顕著であった。これらの結果は、“WT1遺伝子は、造血細胞では、がん抑制遺伝子というよりも、むしろ、発がん遺伝子様の機能をもっていることを示唆し、WT1遺伝子がLeukemogenesisに重要な役割を果たしていることが示された。