| Project/Area Number |
10671776
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Section | 一般 |
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| Research Field |
病態科学系歯学(含放射線系歯学)
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| Research Institution | Ohu University |
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Principal Investigator |
佐藤 篤 奥羽大学, 歯学部・口腔外科第I講座 (30192090)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
渡辺 真喜子 奥羽大学, 歯学部・口腔外科第I講座, 助手 (70306091)
落合 政幸 奥羽大学, 歯学部・口腔外科第I講座, 助手 (40285713)
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| Project Period (FY) |
1998
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 1998)
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| Budget Amount *help |
¥1,500,000 (Direct Cost: ¥1,500,000)
Fiscal Year 1998: ¥1,500,000 (Direct Cost: ¥1,500,000)
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| Keywords | 偏平上皮癌細胞株(NA) / ペプレオマイシン / アポトーシス / IL-1α / TNF-α / IFN-γ / IL-2 / IL-6 |
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| Research Abstract |
1, 扁平上皮癌細胞株(NA)の培養、増殖曲線について
10%FCS+Eagle′sMEM培地に約2X10^4個/mlの細胞をまき、培養を開始する。細胞数は、平均で2日目2.6X10^4個/ml、3日目6.3X10^5個/ml、4日目4.2X10^6/ml、5日目5、2X10^6個/mlとなった。トライパンブルー染色にて死細胞の割合を確認すると3日目、4日目は10%以下で、5日目以降死細胞の割合は著しく増加した。本実験では、細胞増殖の盛んな培養3日目のものを選択した。
2, NA細胞に与えるペプレオマイシン(PEP)の影響
扁平上皮癌に対する代表的抗癌剤であるPEPを種々の濃度で培養細胞にエキスポージャー後、12、24時間で培養細胞に与えるPEPの影響を検討した。その結果、100mcg濃度のPEPで細胞は早期の段階ですべて死滅した。lmcg、10mcgPEP濃度で細胞のアポトーシスが認められた。0.01mcg以下の濃度では変化は認められなかった。アポトーシスはDNA電気泳動によるラダーの検出で判定した。
3, NA細胞培養液中の各種サイトカインの濃度とPEPの影響
同様にPEPで12時間エキスポージャー後の培養液中の各種サイトカイン量を測定した。0,1〜10mcgPEP濃度でほぼ濃度依存性にIL-1α、TNF-α、IFN-γの増加傾向が認められた。IL-2、IL-6については変化は認められなかった。
なお、腫瘍細胞の増殖に関与するとされるTGF-β、IL-12については今後検討する予定である。また、培養液中のサイトカインの増加が細胞の破壊によるものか、リリースによるものか区別するため、mRNA発現について今後検討したい。さらに宿主の免疫機構の変化を検討するため、NA細胞移植マウスについて今後同様の検討を加えたい。
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