| Project/Area Number |
10750574
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Field |
生物・生体工学
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| Research Institution | Tokyo Institute of Technology |
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Principal Investigator |
蒲池 利章 東京工業大学, 生命理工学部, 助手 (30272694)
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| Project Period (FY) |
1998 – 1999
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 1999)
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| Budget Amount *help |
¥2,100,000 (Direct Cost: ¥2,100,000)
Fiscal Year 1999: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
Fiscal Year 1998: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000)
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| Keywords | ヒドロゲナーゼ / チトクロームc_3 / 硫酸還元菌 / Desulfovibrio / 電子伝達複合体 / 鉄-硫黄クラスター / ニッケル鉄中心 / ヘム |
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| Research Abstract |
本研究はヒドロゲナーゼとチトクロームc_3との間の電子移動速度に対するチトクロームc_3の電荷の影響及び、チトクロームc_3とヒドロゲナーゼの電子移動部位に存在するアミノ酸の同定を目的としている。
まずチトクロームc_3とヒドロゲナーゼの間の電子移動速度をストップトフローを用いて測定したところ、天然の基質であるチトクロームc_3はヒドロゲナーゼとの間で効率の良い電子伝達が可能であることが分かった。
チトクロームc_3とヒドロゲナーゼが効率よく電子伝達することが分かったので、ヒドロゲナーゼとチトクロームc_3との電子伝達複合体に関与する電荷の効果について検討した。チトクロームc_3中の主要な塩基性アミノ酸であるリジン残基を2,4,6-トリニトロベンゼンスルホン酸ナトリウムを用いた。このTNBS修飾チトクロームc_3とヒドロゲナーゼとを組み合わせた水素発生反応の結果、TNBS修飾チトクロームc_3を用いた場合、未修飾のチトクロームc_3に比べ活性が低下することが分かった。これは修飾されたリジン残基がヒドロゲナーゼとの電子伝達に重要な役割を果たしているためであると考えられる。
さらにヒドロゲナーゼと組み合わせた水素吸収反応でも修飾されたリジン残基が電子伝達に重要な役割を果たしていることがわかった。
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