| Project/Area Number |
10770301
|
|---|
| Research Category |
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
|
| Allocation Type | Single-year Grants |
|---|
| Research Field |
Circulatory organs internal medicine
|
|---|
| Research Institution | Asahikawa Medical College |
|---|
Principal Investigator |
佐藤 元彦 旭川医科大学, 医学部, 助手 (40292122)
|
|---|
| Project Period (FY) |
1998 – 1999
|
| Project Status |
Completed (Fiscal Year 1999)
|
| Budget Amount *help |
¥1,900,000 (Direct Cost: ¥1,900,000)
Fiscal Year 1999: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
Fiscal Year 1998: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
|
|---|
| Keywords | 細胞名情報伝達 / 高血圧 / RGS protein / SHR / 細胞内情報伝達 / WKY |
|---|
| Research Abstract |
高血圧発症前(6週令)および発症後(14週令)の高血圧自然発症ラット(SHR)およびその正常対照群であるWKYラットより、脳、心臓、肝臓、腎臓、骨格筋を摘出し各組織よりtotal RNAを抽出した。Total RNAはDnase処理を行い十分純度が高かったのでこれをテンプレートにreverse transcriptaseによりcDNAを作成した。Chatterjeeら(J.Biol.Chem.1997;272:15481)の方法に準じてPCRのprimerはfull sequence増幅用にヌクレオチド1-24、1564-1590に相応して作成した。truncated formのRGS3検出用にヌクレオチド937-965に対するprimerを作成し先のprimer(1564-1590)と組み合わせて3'側の増幅を行った。truncated formのRGS3は5'側が欠損しているため、full sequence用のprimerでは増幅されずより3'側に設定されたtruncated form用のprimerによってのみ増幅される。それぞれの組織でRGS3側の発現をfull sequence、truncated formで検討したところSHR、WKYの各組織ではtruncated formのRGS3が発現されていることが確認された。一方、full sequence RGS3の発現は確認できなかった。SHR、WKY間でRGS3の発現をGAPDHに対する比で検討したが、明らかな差はみられなかった。同様の検討をRGS4について行ったが増幅効率が悪く一定した結果を得られなかった。また、SHRの高血圧発症前後においてRGS3の発現にも明らかな変化は確認できなかった。ACE阻害薬の投与もRGS3の発現に明らかな変化をもたらさなかった。RGS3の発現は厳格に保持されているものと思われた。
|
