| Project/Area Number |
10770555
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Field |
Endocrinology
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
竹森 洋 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (90273672)
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| Project Period (FY) |
1998 – 1999
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 1999)
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| Budget Amount *help |
¥2,300,000 (Direct Cost: ¥2,300,000)
Fiscal Year 1999: ¥700,000 (Direct Cost: ¥700,000)
Fiscal Year 1998: ¥1,600,000 (Direct Cost: ¥1,600,000)
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| Keywords | 副腎球状層 / ZOG / Pref-1 / 分化 / 副腎皮質 / 層分化 / 球状層 / アルドステロン |
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| Research Abstract |
ZOGは副腎皮質球状層に特異的に発現している遺伝子として単離したものである。ZOGタンパクに抗体を利用した組織化学的手法により、ZOGの発現は副腎皮質の層形成(分化)に伴って抑制されることをみいだした。本研究では、ステロイドホルモン産生組織の発生と分化の過程におけるZOGの遺伝子発現機構の解明を目的とし、ZOG遺伝子のプロモター領域の解析および転写調節に関与する領域を同定を試みた。
単離ラットのZOGゲノムを5'端より順次欠失させた複数のレポター遺伝子を構築し、副腎皮質球状層由来細胞株および非副腎由来細胞株にそれぞれ導入し、両細胞間でレポター活性に差をもたらす領域を同定した。同定した特異的領域を非特異的プロモターの上流に導入し転写活性を検討した結果、転写開始点から-76/-47に位置するGCGTGGGCGTGGGCGG配列が副腎球状層特異性に関していることが明らかとなった。一方、この配列に結合する転写因子をゲルシフト法を用いて検索した結果、Sp1やEgrファミリーに属する転写因子が配合し転写を活性化させることが明らかとなった。しかしながら、Sp1やEgrの発現は細胞特性を示さないため、未知なる因子がさらにこの領域に結合する事によって細胞特異性を発揮していることが予想された。そこで、この領域に細かく変異を導入し転写活性と未知なる因子との結合活性の相関を検討した結果、特異的に活性化される最小単位の配列を決定することができ、さらにその配列に結合するタンパクが副腎球状層に由来する細胞にいおてのみ存在することを明らかにできた。今後、この新たな因子を精製同定することにより、副腎球状層の特異性および副腎皮質形成機構を解明できるものと期待される。
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