| Project/Area Number |
10780442
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Field |
Cell biology
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| Research Institution | Kyoto University (1999)
Osaka University (1998) |
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Principal Investigator |
吉田 松生 京都大学, 大学院・医学研究科, 助手 (60294138)
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| Project Period (FY) |
1998 – 1999
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 1999)
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| Budget Amount *help |
¥1,900,000 (Direct Cost: ¥1,900,000)
Fiscal Year 1999: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
Fiscal Year 1998: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
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| Keywords | 骨格筋 / 細胞分化 / MyoD / 転写因子 / 幹細胞 |
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| Research Abstract |
現在までにマウス骨格筋細胞株C2C12の集団が分化する際に、幹細胞様の細胞が生じることを明らかにし、reserve cellsと名付けている。この細胞は、未分化で増殖を行わないが、増殖条件に移すと活発に増殖し、その後分化条件下で分化する。reserve cellsが生じる割合は常に一定で、約50%が分化し、残りがreserve cellsとなる。
本年度は、分化細胞とreserve cellsへの振り分けのメカニズムを解析した。ごく少数の緑色蛍光タンパク質(GFP)で標識したC2C12細胞を未標識細胞と共培養し、1-2日増殖させた後に分化誘導した。分化マーカーによる抗体染色で検討し、1つの細胞の子孫である4ないし16個の細胞の運命を検討した。その結果、一つの細胞由来のクラスターの多く(70-80%)で、すべての細胞が分化するかreserve cellsになるかのいずれかであった。また、この振り分け機構が細胞周期と関連しないことが分かった。更にタイムラプス連続記録と免疫染色により、個々の細胞のMyoDの発現量の関与を検討した。その結果、MyoDの発現量には細胞間に大きなばらつき(約10倍)があり、細胞分裂を経て二つの娘細胞にほぼ同量受け継がれること、一方細胞周期とMyoDタンパク質の量の間には相関が無いことが分かった。
これまでに得た知見と併せて、以下の仮説が立つ。すなわち、細胞に内在し子孫細胞に受け継がれる何らかの機構が、一見均一に見える細胞集団に不均一性を与え、その結果MyoDタンパク質の量がばらつく。分化条件に置かれると、MyoDの多い細胞は分化し少ない細胞はreserve細胞となり、必ず集団として幹細胞集団を維持する。
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