血清学的遺伝子単離法によるATLの遺伝子解析

Research Project

Project/Area Number	10877157
Research Category	Grant-in-Aid for Exploratory Research
Allocation Type	Single-year Grants
Research Field	Hematology
Research Institution	Mie University
Principal Investigator	珠玖洋三重大学, 医学部, 教授 (80154194)
Project Period (FY)	1998
Project Status	Completed (Fiscal Year 1998)
Budget Amount *help	¥1,600,000 (Direct Cost: ¥1,600,000) Fiscal Year 1998: ¥1,600,000 (Direct Cost: ¥1,600,000)
Keywords	adult T cell leukemia / SEREX法 / HUB1遺伝子 / 自己抗体
Research Abstract	成人T細胞白血病(adult T cell leukemia:ATL)に対する免疫応答の標的抗原分子及びその支配遺伝子の同定を試みた。ATLの樹立細胞株ST1よりphage cDNA libraryを作製した。ATL患者血清を100倍に稀釈し、SEREX法によりmembrane3000個のプラークになる条件で、血清中IgG抗体により検出されるクローンを検索した。10個の陽性クローンが検出され、塩基配列の決定により7個は既知の3個はこれまでに未報告のcDNAであった。複数のATL患者血清とも反応するクローンの一つHUB1(HTLV-1 U5RE binding protein 1)につきglutathione S transferaseとの融合蛋白を作製し、thrombinの処理の後HUB1蛋白を調整した。ATL患者、無症候性HTLV-1感染者及び正常人血清中のHUB1に対する抗体の存否をwestern blot法で検討した。ATL患者血清では21/30、HTLV-1感染者血清では10/24、正常人血清中では19/24に抗体が検出された。このことよりHUBlに対する抗体の出現とATL発症との関係が示唆された。