G_<M2>アクチベーターによるホスホリパーゼDの活性化機構に関する研究

Research Project

Project/Area Number	10878106
Research Category	Grant-in-Aid for Exploratory Research
Allocation Type	Single-year Grants
Research Field	Functional biochemistry
Research Institution	Kobe University
Principal Investigator	中村俊一神戸大学, 医学部, 教授 (40155833)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	岡田太郎神戸大学, 医学部, 助手 (80304088) 三輪教子神戸大学, 医学部, 助手 (50202354)
Project Period (FY)	1998
Project Status	Completed (Fiscal Year 1998)
Keywords	ホスホリパーゼD / G_<M2>アクチベーター / ADP-リボシル化因子 / 細胞内情報伝達 / コリン燐脂質
Research Abstract	ホスホリパーゼD(PLD)は、様々な細胞刺激に連動して活性化され、ホスファチジルコリンを加水分解し、脂質メディエーターを産生する情報変換酵素である。PLDの活性化にはARFなとの低分子量型G蛋白質が関与することが報告されていたが、精製された系ではその活性化が弱いことから、別の因子の関与が示唆されてきた。我々は、ラットの腎臓の可溶性画分にPLDに対する熱に安定な活性化因子を見い出し、これを単離精製した。この因子は、電気泳動上分子量約23kの蛋白質で、in vitroに於いてARFと相乗的にPLDを活性化した。次に、この蛋白質をプロテアーゼ処理を行い、得られたペプチドのアミノ酸配列を決定したところ、ガングリオシド代謝に関与するG_<M2>アクチベーターと一致した。更に、精製されたPLDの活性化因子を用いて、G_<M2>アクチベーター活性として知られる、βヘキソミニダーゼAの活性化を測定した結果、この酵素の活性化能を有することが分かった。以上の結果は、G_<M2>アクチベーターが多機能を有する調節蛋白質であるとともに、G_<M2>アクチベーター欠損の結果引き起こされる、G_<M2>ガングリオシドーシスの病態にPLDが関与することを示唆するものである。