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インフルエンザウイルスの異種宿主間伝播に関与する細胞因子の研究

Research Project

Project/Area Number 10F00109
Research Category

Grant-in-Aid for JSPS Fellows

Allocation TypeSingle-year Grants
Section外国
Research Field Applied veterinary science
Research InstitutionHokkaido University

Principal Investigator

高田 礼人  北海道大学, 人獣共通感染症リサーチセンター, 教授

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) MANZOOR Rashid  北海道大学, 人獣共通感染症リサーチセンター, 外国人特別研究員
Project Period (FY) 2010 – 2012
Project Status Completed (Fiscal Year 2012)
Budget Amount *help
¥2,100,000 (Direct Cost: ¥2,100,000)
Fiscal Year 2012: ¥600,000 (Direct Cost: ¥600,000)
Fiscal Year 2011: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
Fiscal Year 2010: ¥600,000 (Direct Cost: ¥600,000)
Keywordsインフルエンザウイルス / ポリメラーゼ / 宿主因子 / ホリメラーゼ
Research Abstract

オルソミクスウイルス科に属するA型インフルエンザウイルスは様々な鳥類および哺乳類に感染する人獣共通感染症病原体である。その宿主域を決定する因子についてはこれまでに数多くの報告がなされている。それら因子のうちのいくつかは、宿主域のみならずウイルスの病原性をも決定することが知られている。しかしながら、ウイルスが宿主細胞へ侵入した後、それら因子がどのような宿主因子と相互作用し、どのようにウイルスの宿主域や病原性に関与しているのかを説明する知見はほとんど見られない。本研究は、これまで解明できなかったインフルエンザウイルスポリメラーゼ蛋白質と宿主因子の相互作用に関する様々な新しい知見を得ることを目的とする。
FLAGタグをC末端あるいはN末端に付した組換えインフルエンザウイルス(HK483およびHK486株)ポリメラーゼ蛋白質(PB2、PB1およびPA蛋白質)を単独で発現するプラスミドを293T細胞に導入し、可溶化後、抗FLAGタグ抗体ビーズを用いて免疫沈降した。SDS-PAGEで展開した結果、幾つかの宿主由来蛋白質バンドが確認された。これらのバンドを資料分析によって解析した結果、宿主蛋白質であるHsp70およびhnRNP等であることが判明した。これらの蛋白質はポリメラーゼと相互作用する因子である可能性が高い。共焦点顕微鏡を用いた観察によって、ポリメラーゼとこれらの宿主蛋白質は細胞内で共局在することが明らかとなった。HK483およびHK486株以外のインフルエンザAウイルスでの同様の現象が認められた。特にPB2蛋白質との相互作用が重要であった。さらに、siRNAを用いてHsp70をノックダウンした細胞(293TおよびHera細胞)では、インフルエンザウイルスの増殖が抑えられることを見出した。また、各種ストレスによって細胞内に核内に誘導されるHsp70発現とウイルス増殖効率の間に相関があることを見出した。
以上の結果は、Hsp70はインフルエンザAウイルスの増殖効率を高める宿主因子であることを示唆している。

Report

(3 results)
  • 2012 Annual Research Report
  • 2011 Annual Research Report
  • 2010 Annual Research Report
  • Research Products

    (9 results)

All 2012 2011

All Journal Article (5 results) (of which Peer Reviewed: 5 results) Presentation (4 results)

  • [Journal Article] Inhibitory effects of an M2-specific monoclonal antibody on different strains of influenza A virus2012

    • Author(s)
      Muto NA, Yoshida R, Suzuki T, Kobayashi S, Ozaki H, Fujikura D, Manzoor R, Muramatsu M, Takada A, Kimura T, Sawa H.
    • Journal Title

      Jpn J Vet Res

      Volume: 60 Pages: 71-83

    • Related Report
      2012 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Inhibition of Marburg virus budding by nonneutralizing antibodies to the envelope glycoprotein.2012

    • Author(s)
      Kajihara M, Marzi A, Nakayama E, Noda T, Kuroda M, Manzoor R, Matsuno K, Feldmann H, Yoshida R, Kawaoka Y, Takada A.
    • Journal Title

      J Virol.

      Volume: 86 Issue: 24 Pages: 13467-13474

    • DOI

      10.1128/jvi.01896-12

    • NAID

      120005228739

    • Related Report
      2012 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Characterization of influenza A viruses isolated from wild waterfowls in Zambia2011

    • Author(s)
      Simulundu E, et al
    • Journal Title

      J.Gen.Virol.

      Volume: 92 Issue: 6 Pages: 1416-1427

    • DOI

      10.1099/vir.0.030403-0

    • Related Report
      2011 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] An H5N1 highly pathogenic avian influenza virus that invaded Japan through waterfowl migration2011

    • Author(s)
      Kajihara M, et al
    • Journal Title

      Jpn.J.Vet.Res.

      Volume: 59 Pages: 89-100

    • Related Report
      2011 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] A vaccine prepared from a non-pathogenic H5N1 influenza virus strain from the influenza virus library conferred protective immunity to chickens against the chall enge with antigenically drifted highly pathogenic avian influenza virus2011

    • Author(s)
      Samad RA, et al
    • Journal Title

      Jpn.J.Vet.Res.

      Volume: 59 Pages: 23-29

    • Related Report
      2011 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Presentation] Modulatory effect of heat shock protein 70 (Hsp70) on influenza virus replication2012

    • Author(s)
      Manzoor Rashid、黒田和道、吉田玲子、津田祥美、藤倉大輔、宮本洋子、喜田宏、高田礼人
    • Organizer
      第60回日本ウイルス学会学術集会
    • Place of Presentation
      大阪国際会議場(大阪市)
    • Year and Date
      2012-11-14
    • Related Report
      2012 Annual Research Report
  • [Presentation] 抗体によるマールブルグウイルスの出芽阻害2012

    • Author(s)
      梶原将大、Marzi Andrea、中山絵里、野田岳志、黒田誠、Manzoor Rashid、Feldmann Heinz、吉田玲子、河岡義裕、高田礼人
    • Organizer
      第60回日本ウイルス学会学術集会
    • Place of Presentation
      大阪国際会議場(大阪市)
    • Year and Date
      2012-11-13
    • Related Report
      2012 Annual Research Report
  • [Presentation] Heat shock protein 70 (HSP70) modulates the influenza virus replication2012

    • Author(s)
      Manzoor R, et al
    • Organizer
      XV International Congress of Virology
    • Place of Presentation
      札幌コンベンションセンター(札幌市)
    • Year and Date
      2012-09-15
    • Related Report
      2011 Annual Research Report
  • [Presentation] A highly pathogenic avian influenza virus (H5N1) that invaded Japan through waterfowl migration2012

    • Author(s)
      Kajihara M, et al
    • Organizer
      XV International Congress of virology
    • Place of Presentation
      札幌コンベンションセンター(札幌市)
    • Year and Date
      2012-09-14
    • Related Report
      2011 Annual Research Report

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Published: 2010-12-03   Modified: 2024-03-26  

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