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キイロショウジョウバエPDF発現概日時計ニューロンのシナプス出力の解析

Research Project

Project/Area Number 10J04064
Research Category

Grant-in-Aid for JSPS Fellows

Allocation TypeSingle-year Grants
Section国内
Research Field Animal physiology/Animal behavior
Research InstitutionOkayama University

Principal Investigator

梅崎 勇次郎  岡山大学, 大学院・自然科学研究科, 特別研究員(DC2)

Project Period (FY) 2010 – 2011
Project Status Completed (Fiscal Year 2011)
Budget Amount *help
¥1,400,000 (Direct Cost: ¥1,400,000)
Fiscal Year 2011: ¥700,000 (Direct Cost: ¥700,000)
Fiscal Year 2010: ¥700,000 (Direct Cost: ¥700,000)
Keywordsキイロショウジョウバエ / サーカディアンリズム / 概日リズム / 体内時計 / PDF / 色素拡散因子 / 神経機構 / 時計ニューロン
Research Abstract

本年度は以下の結果を得た。1.PDFおよびUNTが温度同調に果たす役割を検討するため、Pdf欠損系統Pdf^0、UNTによる神経伝達を破傷風毒素(TNT)の特異的発現により阻害したPdf-gal4/uas-TNT-E(Pdf>TNT)、およびPdfを欠損しかつUNTの伝達を阻害したPdf-gal4/uas-TNT-E;Pdf^0(Pdf>TNT;Pdf^0)を用いて、恒暗下で温度サイクル(DD+TC)を与えて同調後、TCを6時間シフトして同調過程を調べた。その結果、1.野生型、Pdf^0では約3サイクル後に同調したのに対し、Pdf>TNTでは約8サイクル後に同調したことから、UNTは温度同調促進作用を有することが示唆された。また、Pdf>TNT;Pdf^0はピークが不明瞭ではあるが、高温期で示す活動が温度シフトとともに移行したことから、少なくとも温度同調は確認された。2.野生型、Pdf^0、Pdf>TNTを用いて、昼と夜または低温期と高温期の2ポイントで光同調および温度同調下での各時計細胞での時計タンパク質発現リズムを解析した結果、大きな変化は観察されなかった。今後、ポイント数を増やして詳細な解析を行う必要がある。3.UNTの候補の絞り込みを行う目的で、PDFニューロンで神経伝達物質合成酵素のノックダウン系統を作製し、Pdf>TNTのDD+TC下での特徴的な活動リズムを指標として解析した。その結果、GABA、Acetylcholine、Dopamine、Histamine、Serotonin、Glutamate合成酵素のノックダウン系統で同調までのサイクル数が約5サイクルに遅延したことから、これらがUNTに含まれる可能性が示唆された。今後、スクリーニングした上記の合成酵素のプロモーター配列を利用した形質転換体を用いてGFPを発現させる系統を作製し、PDF免疫染色と組み合わせることにより、伝達物質の同定を進める必要がある。

Report

(2 results)
  • 2011 Annual Research Report
  • 2010 Annual Research Report
  • Research Products

    (8 results)

All 2012 2011 2010 Other

All Journal Article (2 results) (of which Peer Reviewed: 2 results) Presentation (4 results) Remarks (2 results)

  • [Journal Article] Peripheral circadian rhythms and their regulatory mechanism in insects and some other arthropods : a review2012

    • Author(s)
      Tomioka, Kenji
    • Journal Title

      Journal of Comparative Physiology B

      Volume: 182 Issue: 6 Pages: 729-740

    • DOI

      10.1007/s00360-012-0651-1

    • Related Report
      2011 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Blocking synaptic transmission with tetanus toxin light chain reveals modes of neurotransmission in the PDF-positive circadian clock neurons of Drosophila melanogaster2011

    • Author(s)
      Umezaki, Yujiro
    • Journal Title

      Journal of Insect Physiology

      Volume: 57(9) Issue: 9 Pages: 1290-99

    • DOI

      10.1016/j.jinsphys.2011.06.004

    • Related Report
      2011 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 加齢による色素拡散因子(PDF)の発現レベル低下が概日リズムの加齢変調を引き起す2011

    • Author(s)
      梅崎勇次郎
    • Organizer
      第18回日本時間時間生物学会学術大会
    • Place of Presentation
      名古屋大学東山キャンパス
    • Related Report
      2011 Annual Research Report
  • [Presentation] A possible synaptic transmission involved in the Drosophila circadian clock2011

    • Author(s)
      Tomioka, Kenji
    • Organizer
      3^<rd> World Congress of Chronobiology
    • Place of Presentation
      Puebla, Mexico
    • Related Report
      2011 Annual Research Report
  • [Presentation] Analysis of ageing of the circadian clock system in the fruit fly, Drosophil a melanogaster2010

    • Author(s)
      Yujiro Umezaki
    • Organizer
      International Conference on Invertebrate Reproduction and Development in the Age of Genetic Modifications
    • Place of Presentation
      Prague, Czech
    • Related Report
      2010 Annual Research Report
  • [Presentation] キイロショウジョウバエ概日リズムの加齢変化への色素拡散因子(PDF)の関与の検討2010

    • Author(s)
      梅崎勇次郎
    • Organizer
      日本動物学会第81回大会
    • Place of Presentation
      東京
    • Related Report
      2010 Annual Research Report
  • [Remarks]

    • URL

      http://www.biol.okayama-u.ac.jp/tomioka1/top.html

    • Related Report
      2011 Annual Research Report
  • [Remarks]

    • URL

      http://www.biol.okayama-u.ac.jp/tomioka1/tomioka_lab.html

    • Related Report
      2010 Annual Research Report

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Published: 2010-12-03   Modified: 2024-03-26  

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