血管特異的コンディショナルターゲティングによるRAMP2の病態生理学的意義の解明

• Project/Area Number: 10J07696
• Research Category: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• Allocation Type: Single-year Grants
• Section: 国内
• Research Field: Circulatory organs internal medicine
• Research Institution: Shinshu University
• Principal Investigator: 小山 晃英 信州大学, 医学系研究科, 特別研究員(DC1)
• Project Period (FY): 2010 – 2012
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2012)
• Budget Amount: ¥2,100,000 (Direct Cost: ¥2,100,000); Fiscal Year 2012: ¥700,000 (Direct Cost: ¥700,000); Fiscal Year 2011: ¥700,000 (Direct Cost: ¥700,000); Fiscal Year 2010: ¥700,000 (Direct Cost: ¥700,000)
• Keywords: アドレノメデュリン / RAMP2 / 血管内皮細胞 / 血管新生 / 血管恒常性 / 遺伝子欠損マウス / 臓器保護 / 細胞骨格 / 血管の恒常性 / リンパ管新生 / RAMP / 血管

Research Abstract

アドレノメデュリン(AM)は多くの組織に分布し、血管拡張作用に加え、抗炎症作用、臓器保護作用など、多彩な生理活性を有するペプチドである。AMノックアウトマウス(AM-/-)は、血管の構造異常により胎生致死となる。更に、AMの受容体活性調節タンパクであるRAMP2のノックアウトマウス(RAMP2-/-)はAM-/-同様、血管の発達不全、構造異常により胎生致死となる事から、RAMP2によって、AMの血管新生作用が規定されていることを、我々はこれまで報告してきた。
本研究では、血管のAM-RAMP2系の病態生理学的意義を解明するために、血管内皮細胞特異的RAMP2コンディショナルノックアウトマウス(E-RAMP2-/-)ラインを樹立し、解析を行なった。E-RAMP2-/-のほとんどは出生前後に致死であり、成体での解析に限界があった。このため本年度の研究では、成体になってからRAMP2欠損誘導を可能とする、薬剤誘導性血管内皮細胞特異的RAMP2コンディショナルノックアウトマウス(DI-E-RAMP2-/-)ラインを樹立し、解析を行った。
DI-E-RAMP2-/-では、RAMP2欠損誘導後早期から、血管透過性亢進に伴う全身性浮腫の発症が認められた。このときの血管内皮細胞は、細胞骨格を担うアクチンが重合不全を起こしており、cortical actin ringの形態異常が認められた。アクチン重合を制御するRhoファミリーの活性を検討したところ、DI-E-RAMP2-/-の血管内皮細胞では、Rac1の活性が低下しており、RhoAの活性が亢進していた。一方、血管内皮細胞にAMを添加すると、cortical actin ringは増強し、その作用はRac1阻害剤により抑制された。
以上の結果から、AM-RAMP2系が血管内皮細胞の細胞骨格形成を制御しており、血管の恒常性維持に必須であることが明らかとなった。

Research Products

• [Journal Article] Novel regulation pf cardiac metabolism and homeostasis by the adrenomedullin- receptor activity-modifying protein 2 system (2013)
  • Author(s): Takahiro Yoshizawa, Takayuki Sakurai, Akiko Kamiyoshi, Yuka Ichikawa-Shindo, Hisaka Kawate, Yasuhiro Iesato, Teruhide Koyama, Ryuichi Uetake, Lei Yang, Akihiro Yamauchi, Megumu Tanaka, Yuichi Toriyama, Kyoko Igarashi, Tsutomu Nakada, Toshihide Kashihara, Mitsuhiko Yamada, Hayato Kawakami, Hiroki Nakanishi, Ryo Taguchi, Tsuyoshi Nakanishi, Hiroshi Akazawa, Takayuki Shindo
  • Journal Title: Hypertension Volume: 61 Issue: 2 Pages: 341-351
  • DOI: 10.1161/hypertensionaha.111.00647
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Vascular Endothelial Adrenomedullin-RAMP2 System 18 Essential for Vascular Integrity and Organ Homeostasis (2013)
  • Author(s): Teruhide Koyama. Laura Ochoa-Callejero, Takayuki Sakurai, Akiko Kamiyoshi, Yuka Ichikawa-Shindo, Nobuyoshi Iinuma, Takuma Arai, Takahiro Yoshizawa, Yasuhiro Iesato, Yang Lei, Ryuichi Uetake, Akihiro Yamauchi, Megumu Tanaka, Kyoko Igarashi, Yuichi Tbriyama, Ralf H. Adams, Hayato Kawakami, Naoki Mochizuki, Alfredo Martinez, Takayuki Shindo
  • Journal Title: Circulation Volume: 127 Issue: 7 Pages: 842-853
  • DOI: 10.1161/circulationaha.112.000756
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] 発生および病態におけるアドレノメデュリン-RAMP2システムの役割 (2012)
  • Author(s): 小山晃英
  • Journal Title: 信州医学雑誌 Volume: 60 Pages: 163-165
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Endogenous CGEP protects against neointimal hyperplasia following wire-induced vascular injury (2012)
  • Author(s): Lei Yang, Takayuki Sakurai, Akiko Kamiyoshi, Yuka Ichikawa-Shindo, Hisaka Kawate, Takahiro Yoshizawa, Tteruhide Kovama. Yasuhiro Iesato, Ryuichi Uetake, Akihiro Yamauchi, Megumu Tanaka, Yuichi Toriyama, Kyoko Igarashi, Takayuki Shindo
  • Journal Title: Journal of Molecular and Cellular Cardiology Volume: 59 Pages: 55-56
  • DOI: 10.1016/j.yjmcc.2013.02.002
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] 血管内皮細胞のアドレノメデュリン-RAMP2システムによる血管恒常性維持機構 (2011)
  • Author(s): 小山晃英
  • Journal Title: 血管 Volume: volume34(4) Pages: 153-157
  • NAID: 10030334834
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Induction of LYVE-1/stabilin-2-positive liver sinusoidal endothelial-like cells from embryoid bodies by modulation of adrenomedullin-RAMP2 signaling (2011)
  • Author(s): Takuma Arai, Teuhide Koyama, Takayuki Shindo, et al
  • Journal Title: peptides Volume: Volume32(9) Issue: 9 Pages: 1855-65
  • DOI: 10.1016/j.peptides.2011.07.005
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] アドレノメデュリン-RAMP2システムによる血管恒常性維持と発生および老化の制御 (2011)
  • Author(s): 小山晃英
  • Journal Title: BIOMEDICAL CERONTOLOGY Volume: Volume34, NO.3 Pages: 27-30
  • NAID: 10026696394
  • Peer Reviewed
• [Presentation] Adrenomedullin-RAMP2 system is essential for regulation of endothelial cytoskeletal organization and vascular homeostasis (2012)
  • Author(s): Teruhide Koyama, Laura Ochoa-Callejero, Takayuki Sakurai, Akiko Kamiyoshi, Yuka Ichikawa-Shindo, Nobuyoshi Iinuma, Takuma Arai, Takahiro Yoshizawa, Yasuhiro Iesato, Yang Lei, Ryuichi Uetake, Akihiro Yamauchi, Megumu Tanaka, Kyoko Igarashi, Yuichi Tbriyama, Ralf H. Adams, Hayato Kawakami, Naoki Mochizuki, 、Alfredo Martinez, Takayuki Shindo
  • Organizer: 第20回日本血管生物医学会学術集会
  • Place of Presentation: 徳島
  • Year and Date: 2012-12-07
• [Presentation] Vascular Endothelial Adrenomedullin-RAMP2 System is Essential for Vascular Integrity and Organ Homeostasis (2012)
  • Author(s): Teruhide Koyama, Laura Ochoa-Callejero, Takayuki Sakurai, Akiko Kamiyoshi, Yuka Ichikawa-Shindo, Nobuyoshi Iinuma, Takuma Arai, Takahiro Yoshizawa, Yasuhiro Iesato, Yang Lei, Ryuichi Uetake, Ayano Okimura, Akihiro Yamauchi, Megumu Tanaka, Kyoko Igarashi, Yuichi Toriyama, Hisaka Kawate, Ralf H. Adams, Hayato Kawakami, Naoki Mochizuki, Alfredo Martinez, Takayuki Shindo
  • Organizer: 第35回日本高血圧学会学術総会
  • Place of Presentation: 名古屋
  • Year and Date: 2012-09-20
• [Presentation] The maintenance of vascular homeostasis regulated by Adrenomedullin-RA]MP2 system (2012)
  • Author(s): Teruhide Koyama, Takayuki Sakurai, Akiko Kamiyoshi, Yuka Shindo, Yasuhiro Iesato, Yang Lei, Takahiro Yoshizawa, Ryuichi Uetake, Akihiro Yamauchi, Megumu Tanaka, Kyoko Igarashi, Yuichi Toriyama, Takayuki Shindo
  • Organizer: 第44回日本動脈硬化学会学術総会
  • Place of Presentation: 博多
  • Year and Date: 2012-07-19
• [Presentation] Vascular Integrity of AM-RAMP2 System Contributes to Maintenance of Organ Protection (2012)
  • Author(s): 小山晃英
  • Organizer: 第76回日本循環器学会
  • Place of Presentation: 福岡国際会議場(福岡県)
  • Year and Date: 2012-03-17
• [Presentation] Adrenomedullin-RAMP2 system, as a novel regulator of vascular endothelial integrity (2011)
  • Author(s): 小山晃英
  • Organizer: 第19回日本血管生物医学会
  • Place of Presentation: 東京ステーションコンファレンス(東京都)
  • Year and Date: 2011-12-03
• [Presentation] アドレノメデュリン-RAMP2システムは血管恒常性維持に必須である (2011)
  • Author(s): 小山晃英
  • Organizer: 第15回日本心血管代謝内分泌学会学術総会
  • Place of Presentation: 千里ライフサイエンスセンター(大阪府)
  • Year and Date: 2011-11-25
• [Presentation] Adrenomedullin-RAMP2 system regulates vascular endothelial integrity (2011)
  • Author(s): Teruhide Koyama
  • Organizer: 2011 American Heart Association's
  • Place of Presentation: Orland (USA)
  • Year and Date: 2011-11-16
• [Presentation] Regulation of vascular integrity by adrenomedullin-RAMP2 system in endothelial cells (2011)
  • Author(s): Teruhide Koyama
  • Organizer: 第75回日本循環器学会
  • Place of Presentation: パシフィコ横浜(神奈川県)
  • Year and Date: 2011-08-04
• [Presentation] Regulation of Vascular Endothelial Integrity by Adrenomedullin-RAMP2 System (2011)
  • Author(s): Teruhide Koyama
  • Organizer: 第34回日本動脈硬化学会
  • Place of Presentation: ロイトン札幌(北海道)
  • Year and Date: 2011-07-15
• [Presentation] Role of Adrenomedullin-RAMP2 system for vascular endothelial function (2011)
  • Author(s): Teruhide Koyama
  • Organizer: 第29回内分泌サマーセミナー
  • Place of Presentation: 艮陵会館(宮城県)
  • Year and Date: 2011-07-08
• [Presentation] 血管内皮細胞のアドレノメデュリン-RAMP2システムによる血管恒常性維持機構 (2011)
  • Author(s): 小山晃英
  • Organizer: 第40回 日本心脈管作動物質学会
  • Place of Presentation: 香川
  • Year and Date: 2011-02-04
• [Presentation] 血管内皮細胞におけるアドレノメデュリン-RAMP2システムの役割 (2010)
  • Author(s): 小山晃英
  • Organizer: 第18回日本血管生物医学会
  • Place of Presentation: 大阪
  • Year and Date: 2010-12-03
• [Presentation] The role of adrenomedullin-RAMP2 system in vascular endothelial cells. (2010)
  • Author(s): Teruhide Koyama
  • Organizer: 第18回日本血管生物医学会
  • Place of Presentation: 大阪
  • Year and Date: 2010-12-03
• [Presentation] アドレノメデュリン-RAMP2システムによる血管新生・血管保護作用 (2010)
  • Author(s): 小山晃英
  • Organizer: 第33回日本高血圧学会学術集会
  • Place of Presentation: 福岡
  • Year and Date: 2010-10-15
• [Presentation] Regulation of vascular homeostasis by adrenomedullin-RAMP2 system in development and senescence. (2010)
  • Author(s): Teruhide Koyama
  • Organizer: Asian Aging Core for Longevity 2010
  • Place of Presentation: チェジュ(韓国)
  • Year and Date: 2010-08-23
• [Presentation] アドレノメデュリン-RAMP2系による、発生および老化における血管恒常性維持 (2010)
  • Author(s): 小山晃英
  • Organizer: 第33回日本基礎老化学会
  • Place of Presentation: 名古屋
  • Year and Date: 2010-06-18
• [Presentation] AM-RAMP2 System, as a Novel Regulator of Angiogenesis, Vascular Integrity, and Homeostasis. (2010)
  • Author(s): Teruhide Koyama
  • Organizer: International Symposium on Cardiovascular Endocrinology and Metabolism
  • Place of Presentation: 奈良
  • Year and Date: 2010-04-01
• [Remarks]
  • URL: http://www7a.biglobe.ne.jp/~shindo/