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軟骨・非軟骨細胞におけるマイナーコラーゲン分子の発現機構及び生物活性に関する研究

Research Project

Project/Area Number 11470312
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (B)

Allocation TypeSingle-year Grants
Section一般
Research Field Orthopaedic surgery
Research Institution大分医科大学

Principal Investigator

吉岡 秀克  大分医科大学, 医学部, 教授 (00222430)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 二宮 善文  岡山大学, 医学部, 教授 (70126241)
松尾 哲孝  大分医科大学, 医学部, 助手 (10284788)
モハメド カレドザマン  大分医科大学, 医学部, 助手 (70305035)
調 恒明  大分医科大学, 医学部, 助教授 (50179058)
Project Period (FY) 1999 – 2001
Project Status Completed (Fiscal Year 2001)
Budget Amount *help
¥14,800,000 (Direct Cost: ¥14,800,000)
Fiscal Year 2001: ¥2,800,000 (Direct Cost: ¥2,800,000)
Fiscal Year 2000: ¥2,800,000 (Direct Cost: ¥2,800,000)
Fiscal Year 1999: ¥9,200,000 (Direct Cost: ¥9,200,000)
Keywordsマイナーコラーゲン / 遺伝子発現 / 軟骨 / 細胞外マトリックス / リコンビナントタンパク
Research Abstract

1.α1(XI)鎖コラーゲン遺伝子の発現調節機構の解析
ルシフェラーゼアッセイを用いて、プロモーター活性をみるとα1(XI)の発現細胞であるA204細胞では-199〜-65において、非発現細胞のHT1080細胞に比べ有意に上昇していた。この領域に結合する因子を検索する目的でゲルシフトアッセイを行った。その結果、-147〜-121に結合する因子が存在することがわかり、さらに変異を入れたコンストラクトを作製し解析を行った結果、-140〜-131の領域がこの因子の結合に重要であることがわかった。
2.α1(V)鎖コラーゲン遺伝子の発現調節機構の解析
マウスのプロモーター領域をルシフェラーゼアッセイを用いて解析した。α1(V)の産生細胞であるA204及びNIH3T3細胞においては-231〜+39の領域にプロモーター活性を認めた。一方、非産生細胞HT1080細胞においてはその活性が見られなかった。又、ゲルシフトを行い、-250〜-80の領域において三箇所のタンパクの結合する領域を同定した。そのうちの二箇所は同一又は類似の因子が結合してその活性を下げると思われ、残りの一箇所は逆に上げる因子の関与が考えられた。
3.α1(XI)鎖コラーゲンNプロペプチド(NPP)の機能解析
ヘパリンカラムを用いてリコンビナントのNppの溶出を調べると、このペプチドはヘパリンに対し有意に親和性が見られた。

Report

(4 results)
  • 2001 Annual Research Report   Final Research Report Summary
  • 2000 Annual Research Report
  • 1999 Annual Research Report
  • Research Products

    (21 results)

All Other

All Publications (21 results)

  • [Publications] Nakano S, et al.: "Differential tissular expression and localization of type IV collagen"Laboratory Investigation. 79. 281-292 (1999)

    • Related Report
      2001 Final Research Report Summary
  • [Publications] Saito K, et al.: "Differential expression of mouse α5(IV) and a 6(IV) collagen gene"J.of Biochemistry (Tokyo). 128. 427-434 (2000)

    • Related Report
      2001 Final Research Report Summary
  • [Publications] Fujiwara S, et al.: "Epiplakin, a novel member of the plakin family"J.of Biological Chemistry. 276. 13340-13347 (2001)

    • Related Report
      2001 Final Research Report Summary
  • [Publications] Iyama K, et al.: "Differential expression of two exons of the a α1(XI) collagen gene"Matrix Biol.. 20.1. 53-61 (2001)

    • Related Report
      2001 Final Research Report Summary
  • [Publications] Sumiyoshi H, et al.: "Type XIX collagen is expressed transiently during myoblast"Dev.Dynamics. 220.2. 155-162 (2001)

    • Related Report
      2001 Final Research Report Summary
  • [Publications] Chen Y, et al.: "Cis-acting elements regulate alternative splicing"Matrix Biol.. 20.8. 589-599 (2001)

    • Related Report
      2001 Final Research Report Summary
  • [Publications] 二宮善文 他: "細胞外マトリックス"小出輝、林利彦 編. 544 (2000)

    • Related Report
      2001 Final Research Report Summary
  • [Publications] Fujiwara S et a!.: "Epiplakin, a novel member of the plakin family"J. Boil. Chem.. 276.16. 13340-13347 (2001)

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      2001 Annual Research Report
  • [Publications] Iyama K et a1.: "Differential expression of two exons of the α1(XI) collagen gene"Matrix Biol.. 20.1. 53-61 (2001)

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      2001 Annual Research Report
  • [Publications] Sumiyoshi H et al.: "Type XIX collagen is expressed transiently during myoblast"Dev. Dynamics. 220.2. 155-162 (2001)

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      2001 Annual Research Report
  • [Publications] Chen Y et al.: "Cis-acting elements regulate alternative splicing"Matrix Biol.. 20.8. 589-599 (2001)

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      2001 Annual Research Report
  • [Publications] 吉岡 秀克 他: "軟骨に発現するコラーゲン遺伝子の選択的スプライシング"Connective Tissue. (in press).

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      2001 Annual Research Report
  • [Publications] 住吉 秀明 他: "XIX型コラーゲンに関する最近の知見"Connective Tissue. (in press).

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      2001 Annual Research Report
  • [Publications] Saito K et al: "Differential expression of mouse α5(IV) and α6(IV) collagen gene"J.Biochem.. 128・3. 427-434 (2000)

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      2000 Annual Research Report
  • [Publications] Hirakawa S et al: "The brain link protein-1(BRALI)"Biochem.Biophys Res.Commun.. 276・3. 982-989 (2000)

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      2000 Annual Research Report
  • [Publications] Fujiwara S et al: "Epiplakin,a novel member of the plakin family"J.Biol.Chem.. (in press). (2001)

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      2000 Annual Research Report
  • [Publications] Iyama K et al: "Differential expression of two exons of the α1(XI) collagen gene"Matrix Biol.. (in press). (2001)

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      2000 Annual Research Report
  • [Publications] Sumiyosi H et al: "Type XIX collagen is expressed transiently during myoblast"Dev.Dynam.. (in press). (2001)

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      2000 Annual Research Report
  • [Publications] Nakano S et al: "Differential tissular expression and localization of type IV collagen"Laboratory Investigation. 79・3. 281-292 (1999)

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      1999 Annual Research Report
  • [Publications] 吉岡秀克: "マイナーフィブリル型コラーゲン分子の発現の多様性と機能"生化学. 71・6. 432-438 (1999)

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      1999 Annual Research Report
  • [Publications] 吉岡秀克: "フィブリル型コラーゲン遺伝子の転写調節機構"Connective Tissue. 31・3. 189-196 (1999)

    • Related Report
      1999 Annual Research Report

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Published: 1999-04-01   Modified: 2016-04-21  

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