動物細胞由来のHTLV-Iの高い感染性の解析およびウイルス感染における糖鎖の役割

• Project/Area Number: 11770154
• Research Category: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Virology
• Research Institution: Gunma University
• Principal Investigator: 原口 裕次 群馬大学, 医学部, 助手 (80272251)
• Project Period (FY): 1999 – 2000
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2000)
• Budget Amount: ¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000); Fiscal Year 2000: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000); Fiscal Year 1999: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
• Keywords: HTLV-I / 糖鎖

Research Abstract

1.種々の哺乳動物(ネコ、マウス、ブタ、イヌ、ミンク、ヒト)由来の細胞株に、HTLV-Iが持続感染したヒトT細胞株(2M、SI-5)を混合培養した。その結果、HTLV-Iが持続感染した6種類のネコ由来細胞株(8C/HTLV-I_<2M>、8C/HTLV-I_<SI-5>、PG-4/HTLV-I_<2M>、PG-4/HTLV-I_<SI-5>、G-355/HTLV-I_<2M>、G-355/HTLV-I_<SI-5>)、マウス(NIH3T3/HTLV-I_<2M>)、ブタ(PK(15)/HTLV-I_<2M>)、イヌ(Cf2Th/HTLV-I_<2M>)、ミンク(Mv1Lu/HTLV-I_<2M>)およびヒト由来細胞株(HOS/HTLV-I_<SI-5>)が得られた。
2.HTLV-Iの感染性を、HTLV-Iに特異的なプライマーを用いたcell-free HTLV-I PCR assayを用い調べた。すると、ウサギ細胞株(Ra-1)および1で得られたネコ、イヌおよびミンク細胞株由来のHTLV-Iの感染性は、ヒト細胞株(HOS/HTLV-I_<SI-5>、HOS/PL、MT-2、C91/PL)由来のHTLV-Iの感染性の数十から数千倍であった。
3.ネコ細胞株由来のHTLV-Iは末端αガラクトシル基に結合するレクチン(BS-IB4)で強く感染阻害された。また、ヒトおよびネコ細胞株由来のHTLV-Iはガラクトシル基に結合するレクチン(ECA)で感染阻害された。ウシ白血病ウイルスはこれらのレクチンで感染阻害されなかった。
4.ネコ細胞株由来のHTLV-Iを、末端αガラクトシル基を切断する酵素(αガラクトシダーゼ)で処理すると感染性の低下が認められた。また、末端シアル酸残基を切断する酵素(シアリダーゼ)で処理すると、逆に感染性の上昇が認められた。
5.ヒト細胞株から3種類のガラクトース結合レクチン(ガレクチン1、3および9)遺伝子をクローニングし、発現ベクターpMX-puroに導入した。次に、これらの遺伝子を、HTLV-I非感受性マウス細胞株(Ba-F3)に導入し、安定発現細胞株(Ba-F3/GAL1、Ba-F3/GAL3、Ba-F3/GAL9)の作製に成功した。ガレクチン1を導入したBa-F3細胞株に、ネコ細胞株由来のHTLV-Iを感染させた所、HTLV-Iに対する感受性は影響されなかった。現在、ガレクチン3および9遺伝子を導入したBa-F3細胞株でのHTLV-Iに対する感受性の変化を調べている。

Research Products

• [Publications] Yuji Haraguchi et al.: "Inhibition of HIV-1 infection by zine group metal compound"Antiviral Res.. 43. 123-133 (1999)
• [Publications] Atsushi Jinno et al.: "Inhibition of cell-free human T-cell leukemia virus type 1 infection at a postbinding step by the synthetic peptide derived from an ectodomain of the qp21 transmembrane glycoprotein "J.Virol.. 73. 9683-9689 (1999)
• [Publications] Nobuaki Shimizu et al.: "Changes in and discrepancies between cell tropioms and coreceptor uses of human immunodeficiency virus type 1 induced by single point mutations at the V3 tip of the env protein"Virology. 259. 324-333 (1999)
• [Publications] Deyu Fang et al.: "Beat shock cognate protein 70 is a cell fusion-enhancing factor but not an entry factor for human T-cell lymphotropic virus type I"Biochem.Biophys.Res.Comm.. 261. 357-363 (1999)
• [Publications] Min-Xu Zou et al.: "Apelin peptides block the entry of human immunodeficiency virus(HIV)"FEBS Lett.. 473. 15-18 (2000)
• [Publications] Shigemi Tokizawa et al.: "Infection of mesangial cells with HIV and SIV : identification of GPR1 as a coreceptor "Kidney Int.. 58. 607-617 (2000)
• [Publications] Hui-yu Liu et al.: "CD4-dependent and CD4-independent utilization of coreceptors by human immunodeficiency viruses type 2 and simian immunodeficiency viruses."Virology. 278. 276-288 (2000)
• [Publications] Nobuaki Shimizu et al: "Changes in and discrepancies between cell tropisms and coreceptor uses of human immunodeficiency virus type 1 induced by simple point mutations at the V3 tip of the env protein"Virology. 259. 324-333 (1999)
• [Publications] Yuji Haraguchi et al: "Inhibition of HIV-1 infection by zinc qroup metal compounds"Antiviral Research. 43. 123-133 (1999)
• [Publications] Deyu Fang et al: "Heat shock cognate protein 70 is a cell fusion-enhancing factor but not an entry factor for human T-cell lymphotropic virus type 1"Biochemical and Biophysical Research Communications. 261. 357-363 (1999)
• [Publications] A. Jinno et al: "Inhibition of cell-free human T-cell leukemia virus type 1 infection at a postbinding step by the synthetic peptide derived from an ectodomain of the gp21 transmembrane glycoprotein"Journal of Virology. 73、11. 9683-9689 (1999)