高効率遺伝子導入法を用いた血管内皮E-セレクチンシグナル伝達の解明

• Project/Area Number: 11770349
• Research Category: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Circulatory organs internal medicine
• Research Institution: Tokyo Medical and Dental University
• Principal Investigator: 吉田 雅幸 東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 助教授 (80282771)
• Project Period (FY): 1999 – 2000
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2000)
• Budget Amount: ¥2,100,000 (Direct Cost: ¥2,100,000); Fiscal Year 2000: ¥700,000 (Direct Cost: ¥700,000); Fiscal Year 1999: ¥1,400,000 (Direct Cost: ¥1,400,000)
• Keywords: E-セレクチン / 血管内皮細胞 / 遺伝子導入

Research Abstract

E-セレクチンは血管内皮細胞に発現する接着因子で急性および慢性炎症において重要な働きをしていることが近年明らかになってきた。我々はすでに白血球がE-セレクチンを介して血管内皮細胞に接着する際に、細胞表面のE-セレクチンが細胞骨格と結合することを示し、E-セレクチンのシグナル伝達への関与の可能性を世界に先駆けて報告した。今回、アデノウイルスベクターシステムを利用してE-セレクチンの過剰発現系を構築し、シグナル伝達機構の詳細を解明した。正常型、細胞内ドメイン欠損型のE-セレクチンを過剰発現させた血管内皮細胞をアイソトープでラベルし、そのリン酸化レベルを調べ、E-セレクチンの細胞内ドメインがリン酸化を受けていることを明らかにした。また、このリン酸化は白血球の血管内皮細胞への接着に伴い脱リン酸化を受けることもわかった。今後はこの脱リン酸化機構をさらに詳細にあきらかにしていく。

Research Products

• [Publications] M.Yoshida et al.: "Differentiation-induced transmigration of HL60 cells across activated HUVEC monolayer involves E-selectin-dependent mechanism."Ann.N.Y.Acad.Sci. 902. 307-310 (2000)
• [Publications] H.Ishii,M.Yoshida et al.: "Construction of recomninant adenovial vector of annexin II."Ann.N.Y.Acad.Sci. 902. 310-314 (2000)
• [Publications] Y.Fujii,M.Yoshida et al.: "Significance of Carbohydrate Antigen Sialyl-Lewis X, Sialyl-Lewis A, and Possible Unknown Ligands to Adhesion of Human Urothelial Cancer Cells to Activated Endothelium"Urol.Int.. 64. 129-133 (2000)
• [Publications] H.Ishii,M.Yoshdia et al.: "Adenoviral transduction of human E-selectin into isolated, perfused rat aortic segments : an ex vivo model for studying leukocyte-endothelial interactions."J.Leukocyte Biol. 68,687-692(2000). 68. 687-692 (2000)
• [Publications] Fukuda,Y,Kurihara,N.,Imoto I.,Yasui,K.,Yoshida,M. et al.: "CD44 is a potential target of amplification within the 11p13 amplicon detected in gastric cancer cell lines."Genes, Chromosomes and Cancer. 29. 315-324 (2000)
• [Publications] Doi M,Shichiri M,Yoshida M et al.: "Suppression of integrin alpha (v) expression by endothelin-1 in vascular smooth muscle cells."Hypertens Res. 23. 643-649 (2000)
• [Publications] M. Yoshida, R.E, Gerszten et al: "HMG-CoA Reductase inhibitor ridnced reduction of monocyte adhesion to vascular endothelium involues small GTP binding protein"Circulation suppl.. 100. 1-693 (1999)
• [Publications] R.E. Gevszten, G-Zepada et al.: "MCP.1 and IL-8 trigger firm adhesion of monocytes to vascular endothelium under flow conditions"Nature. 398. 718-723 (1999)
• [Publications] R.E. Gerszten, T. Matsui et al.: "PI3 Kinase is necessary for MCP-1 induced adhesion of the monocytic THP-1 cell lne under flow"Circulation suppl.. 100. 1-615 (1999)
• [Publications] 吉田雅幸: "抗接着分子療法による白血球浸潤の制御"医学のあゆみ. 190. 971-974 (1999)