レチノイン酸によるインターフェロンの腎細胞癌に対する抗腫瘍性の増強効果

• Project/Area Number: 11770903
• Research Category: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Urology
• Research Institution: Saitama Medical University
• Principal Investigator: 野中 昭一 埼玉医科大学, 医学部, 助手 (70255537)
• Project Period (FY): 1999 – 2000
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2000)
• Budget Amount: ¥2,100,000 (Direct Cost: ¥2,100,000); Fiscal Year 2000: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000); Fiscal Year 1999: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000)
• Keywords: 腎細胞癌 / インターフェロン / レチノイン酸

Research Abstract

1)IFN(インターフェロン)、ATRA(オールトランス型レチノイン酸)単独による抗腫瘍性の検討:ACHN細胞、KU-2細胞にIFN-α、IFN-γおよびATRAを加え、各薬剤単独による抗腫瘍効果を細胞増殖曲線およびMTT法により観察した。ACHNではIFN-γにおいて抗腫瘍効果を認めたがIFN-αおよびATRAにおいてはそれを認めなかった。KU-2ではIFN-α、IFN-γおよびATRAのいずれにおいても抗腫瘍効果を認めなかった。
2)ATRA、IFN併用による抗腫瘍性の変化:ATRAで各細胞株をpre-treatment後IFNを加え、IFN単独の場合との抗腫瘍性の違いを検討した。ACHNではIFN-α、IFN-γのいずれにおいても変化を認めなかった。KU-2ではIFN-αにおいて抗腫瘍効果の増強を認めたがIFN-γにおいては変化を認めなかった。
3)ATRA、IFNによるSTAT発現への影響:STAT(Signal Transducers and Activators of Transcription)1、STAT2抗体を用いたウェスタンブロット法により各細胞株のこれらのタンパク発現量の違いを観察した。ACHNではSTAT1、STAT2ともその発現を認めたが、KU-2ではSTAT1は弱発現でSTAT2は発現していなかった。次いでATRA、IFN添加下に各細胞株を培養しSTAT1、STAT2の発現量の経時的変化を観察した。ACHNではATRAおよびIFN添加下でSTAT1、STAT2ともにその発現量の変化はみられなかった。KU-2のATRA添加下でSTAT1では発現量増加がみられたがSTAT2ではその発現量変化はみられなかった。KU-2のIFN添加下ではSTAT1、STAT2ともにその発現量変化はみられなかった。
4)STAT1強発現による抗腫瘍性の変化:KU-2にSTAT1発現プラスミドを導入しSTAT1を強発現させて抗腫瘍性の変化を観察した。IFN-α、IFN-γいずれにおいても抗腫瘍効果に変化を認めなかった。
5)in vivoでのATRAおよびIFN併用による抗腫瘍性の変化:各細胞をヌードマウスに移植してATRAおよびIFNの有無による抗腫瘍性の変化を検討した。各薬剤単独群についてはin vitro同様、ACHNではIFN-γにおいて抗腫瘍効果を認めたがIFN-αおよびATRAにおいてはそれを認めなかった。KU-2ではIFN-α、IFN-γおよびATRAのいずれにおいても抗腫瘍効果を認めなかった。ATRA、IFN併用群と単独群との比較では有意差を認めなかった。