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ヨードシンポーターに対する自己抗体と甲状腺機能低下症に関する研究

Research Project

Project/Area Number 11771508
Research Category

Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Laboratory medicine
Research InstitutionOsaka University

Principal Investigator

日高 洋  大阪大学, 医学系研究科, 助教授 (30243231)

Project Period (FY) 1999 – 2000
Project Status Completed (Fiscal Year 2000)
Budget Amount *help
¥2,400,000 (Direct Cost: ¥2,400,000)
Fiscal Year 2000: ¥700,000 (Direct Cost: ¥700,000)
Fiscal Year 1999: ¥1,700,000 (Direct Cost: ¥1,700,000)
Keywordsヨードシンポーター / 自己免疫性甲状腺炎 / 甲状腺機能低下症 / フローサイトメーター / ELISA
Research Abstract

ヨードシンポーター(NIS)に対する自己抗体を有する自己免疫性甲状腺炎患者では、ヨードの細胞内への取り込み障害が起こり、甲状腺機能低下症になるのではないかと私たちは推定しており、それを証明することが本研究の目的である。平成11年度にはNISを細胞表面に高密度で発現しているHEK細胞を得て、この細胞と自己免疫性甲状腺炎患者血清を反応させ、さらにFITC標識抗ヒトIgG抗体を加え、フローサイトメーターで調べたが、NISを発現していないHEK細胞にも患者血清が結合し、このままでは自己抗体を特異的に検出することができないことが明らかになった。そこで、平成12年度にはヒトNIS-C末端の15アミノ酸に対するウサギ血清よりIgGを精製し、これをELISAプレートに結合させたのち洗浄し、昨年度の研究で得たヒトNISを高密度に発現させたHEK細胞を可溶化し、抗ヒトNISウサギIgGに結合させたのち洗浄し、抗NIS抗体の有無を調べたいヒト血清を加え洗浄し、アルカリフォスファターゼ(AP)を付けた抗ヒトIgG抗体を加え洗浄し、最後にAP基質を加え、その発色の程度により自己抗体の有無を判定した。自己免疫性甲状腺炎患者血清が抗ヒトNISウサギIgGに非特異的に結合してしまうため、ヒトNISに対する自己抗体を特異的に検出することができないことが明らかになった。以上の結果より、現時点でNISのような膜蛋白に対する自己抗体を調べるには、最近報告されだしたin vitro transcription/translationで合成した標識蛋白を用いたradioligand assayが適当な測定法ではないかと推定される。本研究で作成した細胞は自己抗体を測定するためには利用できなかったが、今後NISの自己免疫性甲状腺炎における役割を調べる上で利用していく予定である。

Report

(2 results)
  • 2000 Annual Research Report
  • 1999 Annual Research Report
  • Research Products

    (11 results)

All Other

All Publications (11 results)

  • [Publications] Masahiro Kimura: "Enzyme immunoassay for autoantibodies to human liver-type arginase and its clinical application."Clinial Chemistry. 46・1. 112-117 (2000)

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      2000 Annual Research Report
  • [Publications] Yuki Shimaoka: "Changes in cytokine production during and after normal pregnancy."American Journal of Reproductive Immunology. 44・3. 143-147 (2000)

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      2000 Annual Research Report
  • [Publications] Aya Fujita: "Enzyme-linked immunosorbent assay for anti-tropomyosin antibodies and its clinical application to various heart diseases."Clinca Chimica Acta. 229・1-2. 179-192 (2000)

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  • [Publications] Nobuyuki Amino: "Thyroid function during pregnancy."Clinical Chemistry. 46・7. 1015-1016 (2000)

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      2000 Annual Research Report
  • [Publications] Yuki Shimaoka: "Influence of breast-feeding on the production of cytokines."American Journal of Reproductive Immunology. (発表予定). (2001)

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      2000 Annual Research Report
  • [Publications] Motoshi Okumura: "CD30 expression and intereukin-4 and interferon-γ production of intrathyroidal Iymphocytes in Graves' disease."Thyrodi. 9・4. 333-339 (1999)

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      1999 Annual Research Report
  • [Publications] Aya Yagoro: "Pospartum onset of acute heart failure possibly due to postpartum autoimmune myocarditis: a report of the three cases"Jourmal of Internal Medicine. 245・2. 199-203 (1999)

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  • [Publications] Yukihiko Watanabe: "Polyethylene glycol increases the detection of anti-thyrotropin (TSH) receptor antibodies by a radioreceptor assay"Clinical Chemistry. 45・3. 407-409 (1999)

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  • [Publications] Takashi Iijima: "Incidence of postpartum onset of disease among patients with rheumatoid arthritis,"Journal of Rheumatology. 26・3. 755-756 (1999)

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  • [Publications] Masahiro Kimura: "Enzyme immunoassay for autoantibodies to human liver-type arginase and its clinical application"Clinical Chemistry. 46・1. 112-117 (2000)

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  • [Publications] Yuki Shimaoka: "Changes in cytokine production during and after normal preganacy"American Journal of Reproductive Immunology. (発売予定). (2000)

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      1999 Annual Research Report

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Published: 1999-04-01   Modified: 2016-04-21  

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