| Project/Area Number |
11780497
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Field |
Molecular biology
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| Research Institution | Yokohama City University |
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Principal Investigator |
秋本 和憲 横浜市立大学, 医学部, 助手 (70285104)
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| Project Period (FY) |
1999 – 2000
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2000)
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| Budget Amount *help |
¥2,200,000 (Direct Cost: ¥2,200,000)
Fiscal Year 2000: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000)
Fiscal Year 1999: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000)
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| Keywords | aPKC / Cre / loxP / Atypical Protein Kinase C / ジーンターゲッティング |
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| Research Abstract |
既にCre/loxPシステム用いたaPKCλコンディショナルジーンターゲッティングマウス(以下aPKCλ-loxPマウスと略)とES細胞(aPKCλ-loxPES細胞と略)の樹立に成功し、現在、以下の解析を行っている。
1,樹立したaPKCλ-loxPマウスとCAG-CreTgマウスを交配し、全身でaPKCλ遺伝子を破壊し、いわゆるノックアウトマウスを樹立した。このホモ接合体マウスは胎生致死であり、線虫やショウジョウバエ同様、aPKCλ遺伝子は発生段階で重要な役割を果たしていることが明らかとなった。更に発生のステージを遡って詳細な解析を行った結果、少なくとも発生の初期の段階における上皮形成にこのaPKCλ遺伝子が重要な役割を果たしていることが明らかなった。現在、更なる詳細な解析をおこなっている。
2,aPKCλは胎児のみでなく、成体においても乳腺・大腸など様々な組織の上皮で発現している。そこで、成体組織の上皮におけるaPKCλの役割を明らかとするために、aPKCλ-loxPマウスと乳腺特異的にCreを発現するTgマウスとの交配及びAdenovirus vector-creをaPKCλ-loxPマウスの大腸に導入する方法を用いて、乳腺上皮と大腸上皮特異的にaPKCλ遺伝子を破壊したマウスを作製した。現在その解析を進めている。
3,インビボで得られたフェノタイプを分子メカニズムレベルまで踏み込んで説明する解析を有利にするため、樹立したaPKCλ-loxPES細胞を用いてインビトロでの解析を1,2の解析に並行して行っている。
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