| Project/Area Number |
11780613
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Field |
Biomedical engineering/Biological material science
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
原田 敦史 東京大学, 大学院・工学系研究科, 助手 (50302774)
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| Project Period (FY) |
1999 – 2000
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2000)
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| Budget Amount *help |
¥2,200,000 (Direct Cost: ¥2,200,000)
Fiscal Year 2000: ¥800,000 (Direct Cost: ¥800,000)
Fiscal Year 1999: ¥1,400,000 (Direct Cost: ¥1,400,000)
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| Keywords | 生理活性ペプチド / ポリイオンコンプレックスミセル / 超分子集合体 / ブロック共重合体 / 酵素 / ポリエチレングリコール / コアーシェル構造 / 卵白リゾチーム |
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| Research Abstract |
昨年度、生理活性ペプチド内包ポリイオンコンプレックス(PIC)ミセルの調製及び平均粒径・内包数などの物理化学的諸特性について明らかとした。本年度は、生理活性ペプチド内包ミセルの安定性及び酵素活性などの機能評価を行った。
生理活性ペプチドを内包したポリイオンコンプレックスミセルの安定性評価
モデルペプチドとして卵白リゾチームを内包したPICミセルについて、希釈に対する安定性評価として静的光散乱法により臨界会合濃度(cac)の決定を行った。その結果、PICミセルのcacは荷電を有するセグメントの濃度によって決定されていることが確認された。また、cacは、温度依存性を示したことから、PICミセル形成がエントロピー支配的は会合現象であることが示唆された。
内包された生理活性ペプチドの酵素活性評価
物理化学的諸特性の異なるリゾチーム内包PICミセルについて、内核に保持された状態での酵素活性を内核へ拡散可能な合成基質を用いて評価した結果、PICミセルへの内包によりリゾチームの見かけの活性が最大で2となっていることが確認された。この活性増大の要因を評価するために酵素活性の速度定数を評価した結果、酵素活性の変化はミカエリス定数の著しい減少に起因していることが確認された。また、ミカエリス定数の減少は、ミセル層への基質の濃縮効果によるものである示唆された。そこで、ミセル層への基質の分配係数を算出した結果、この分配係数は、ミセル外殻層厚さに良い相関示すことから、ミセル構造を制御することにより、ミセル内核の酵素反応を制御できることが示唆された。
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