肝細胞癌に対するMAGE-1遺伝子産物ターゲットとした特異的免疫療法

• Project/Area Number: 11877091
• Research Category: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Gastroenterology
• Research Institution: Kyushu University
• Principal Investigator: 林田 一洋 (2001) 九州大学, 医学部・附属病院, 助手 (60180981); 石橋 大海 (1999-2000) 九州大学, 大学院・医学研究院, 助教授 (80127969)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 工藤 二郎 西南女学院大学, 保険福祉学部, 教授 (90148940) ; 林田 一洋 九州大学, 医学部・附属病院, 助手 (60180981)
• Project Period (FY): 1999 – 2001
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2001)
• Budget Amount: ¥2,100,000 (Direct Cost: ¥2,100,000); Fiscal Year 2001: ¥700,000 (Direct Cost: ¥700,000); Fiscal Year 2000: ¥700,000 (Direct Cost: ¥700,000); Fiscal Year 1999: ¥700,000 (Direct Cost: ¥700,000)
• Keywords: 肝細胞癌 / 癌抗原特異的免疫療法 / MAGE遺伝子 / 癌抗原 / T細胞エピトープ

Research Abstract

【背景・目的】
われわれは,肝細胞癌に高率(80%)にMAGE-1遺伝子の発現がみられることを報告した.本研究の目的は,MAGE遺伝子産物をターゲットとした肝細胞癌特異的な免疫療法の臨床応用が可能であるかどうか検討するものである.
【方法・結果】
肝切除術が施行された原発性肝癌症例を対象とし,腫瘍組織よりmRNAを抽出し,β-actinの発現を確認した後,異なるExon間にPrimerを設定し,RT-PCR法によりMAGE-1,2,3遺伝子の発現を観察した.また,肝臓由来の細胞株でも同様の検討を行った.肝癌組織で高率にMAGE-1および-3遺伝子の発現が確認された.切除肝あるいは生検肝を用い,免疫組織学的方法によりMAGE遺伝子産物の発現の検討を行っている.
抗原特異的免疫療法を行うためには,MAGE-1蛋白のT細胞エピトープを明らかにし,エピトープペプチドによるその反応性を検討することが重要である.MAGE-1蛋白のエピトープは、現在のところHLAA1でしか明らかにされていないため,別に研究を進めている原発性胆汁性肝硬変の抗原エピトープ特異的T細胞を用いて,自己抗原エパトープ・ペプチドのアナログペプチドに対するT細胞応答性を解析中である.
【今後の計画】
患者と同一のHLA classI抗原を有した細胞株にMAGE-1遺伝子を導入し,mRNAおよび蛋白レベルでのMAGE-1遺伝子の発現をRT-PCR法およびサザンブロッティング法で確認する.さらに,患者から採取したTリンパ球を,HLA class I matched MAGE-1陽性細胞株をfeederとして培養し,51Crリリース法を用い,feederとして用いた細胞に特異的な細胞障害活性を検討中である.(本研究は13年度途中で研究代表者石橋大海異動のため林田一洋が継続)

Research Products

• [Publications] Van de Water J, Ishibashi H, Coppel RL, Gershwin ME: "Molecular mimicry and primary biliary cirrhosis : Premises not promises"Hepatology. 33(4). 771-775 (2001)
• [Publications] Ishibashi H, Shimoda S, Shigematsu H, Nakamura M: "General Aspects of Molecular Biology and Immunology for the treatment of Intractable Liver Diseases"Elsevier Science BV(In press). (2002)
• [Publications] Kimura,Y.,Hayashida,K.,Ishibashi,H., et al.: "Antibody-free virion titer greatly differs between hepatitis C virus genotypes."Journal of Medical Virology. 61・3. 37-43 (2000)
• [Publications] Fukushima,N.,Ikematsu,H.,Nakamura,M., et al.: "Nucleotide variations amongst V_H genes of AMA-producing B cell clones in primary biliary cirrhosis."Journal of Autoimmunity. 14・3. 247-257 (2000)
• [Publications] Takasaki,S.,Hayashida,K.,Morita,C., et al.: "CD56 directly interacts in the process of NCAM-positive target cell-killing by NK cells."Cell Biology International. 24・2. 101-108 (2000)
• [Publications] Shimoda,S.,Nakamura,M.,Shigematus,H., et al.: "Mimicry peptides of human PDC-E2 163-176 peptide, the immunodominant T-cell epitope of primary biliary cirrhosis."Hepatology. 31・6. 1212-1216 (2000)
• [Publications] Shigematsu,H.,Shimoda,S.,Nakamura,M., et al.: "Fine specificity of T cells reactive to human PDC-E2 163-176 peptide, the immunodominant autoantigen in primary biliary cirrhosis : Implications for molecular mimicry and cross-recognition among mitochondrial autoantigens."Hepatology. 32・5. 901-909 (2000)
• [Publications] Kimura,Y.,Hayashida,K.,Yanagi,Y., et al.: "Low cell binding ability of HCV is closely related to interferon treatment especially in patients with HCV genotype 2a/2b : a large series prospective study on Japanese patients with chronic hepatitis C."Journal of Hepatology. 33. 818-825 (2000)
• [Publications] Dohmen,K.,Shirahama,M.,Onohara,S., et al.: "Differences in survival based on the type of follow-up for the detection of hepatocellular carcinoma : an analysis of 547 patients."Hepatology Research. 18. 110-121 (2000)
• [Publications] Dohmen,K.,Shirahama,M.,Shigematsu,H., et al.: "Transcatheter auterial chemoembolization therapy combined with percutaneous ethanol injection for unresectable large hepatocellular carcinoma : Local therapeutic effect and survival rate."Hepato-Gastroenterology. (in press). (2001)
• [Publications] Ishibashi,H.,et al.: "Antigen peptide analog: Induction of T cell anergy in primary biliary cirrhosis"Internal Medicine. 38・2. 173-175 (1999)