| Project/Area Number |
11J08751
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| Research Category |
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Section | 国内 |
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| Research Field |
General medical chemistry
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| Research Institution | Tokyo University of Pharmacy and Life Science |
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Principal Investigator |
金丸 佳織 東京薬科大学, 生命科学研究科, 特別研究員(DC1)
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| Project Period (FY) |
2011 – 2013
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2013)
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| Budget Amount *help |
¥1,900,000 (Direct Cost: ¥1,900,000)
Fiscal Year 2013: ¥600,000 (Direct Cost: ¥600,000)
Fiscal Year 2012: ¥600,000 (Direct Cost: ¥600,000)
Fiscal Year 2011: ¥700,000 (Direct Cost: ¥700,000)
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| Keywords | イノシトールリン脂質 / アトピー性皮膚炎 / バリア / 皮膚 / PLCδ1 / IL-17 |
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| Research Abstract |
1. PLCδ1欠損マウスの表皮バリア異常についての詳細な解析を目的に、バリア脂質の量の測定を行ったところ、PLCδ1遺伝子欠損マウスにおいてはバリア脂質の減少が観察された。Outside-insideバリアの検討のために、皮膚外部からの色素の透過性についても検討を行ったところ、PLCδ1遺伝子欠損マウス表皮では色素の透過性が充進していることも明らかとなった。これらの結果により、表皮のPLCδ1の欠損が、表皮バリアの形成に異常をきたしていることが明らかとなった。
2. ヒトケラチノサイトにおいてもPLCδ1の欠損によって同様の影響が示されるのかどうか検討を行うことにした。ヒト表皮細胞(Normal Human Epidermal Keratinocyte : NHEK)を用いて皮膚の構造を構築させた、"3次元培養皮膚"を作製、このサンプルを用いて色素の透過性などのバリア異常について検討した。その結果、PLCδ1を発現抑制したNHEKによる3次元培養皮膚サンプルでは色素透過性の充進、バリア脂質の減少など、マウスの表皮と類似したバリア異常が見られることが明らかとなった。
3. 表皮のバリアには角質バリア、タイトジャンクションバリアが存在する。色素透過性の増大により、角質バリアに異常があることは確認されたので、タイトジャンクションバリアについてもPLCδ1の欠損が影響を与えているのかどうか、検討を行った。NHEK細胞を培養した際の、タイトジャンクションタンパク質、zo-1の発現について染色レベルでの検討を行ったところ、その異常が観察された。このことから、PLCδ1発現抑制NHEKではタイトジャンクション形成に異常をきたしており、その結果、バリア異常が引き起こされている可能性が示唆された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
全ての実験計画がほぼ予定通り進められた。若干、計画通りに進める事が困難である部分もあったが、代換え手段を用いることにより当初の目的を果たすことができた。以上のことからおおむね順調に進展していると判断した。
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| Strategy for Future Research Activity |
PLCδ1が表皮ケラチノサイトで欠損することはケラチノサイトの増殖亢進を促し、分化異常を引き起こすことでタイトジャンクションの形成や角質バリアの形成が不十分になり、バリア異常を引き起こしていることが示唆された。そのため、今後はPLCδ1の欠損がどのようなシグナルを介してタイトジャンクションの形成異常を引き起こしているのか、また、バリア脂質の減少を引き起こしているのかなど、詳細なシグナルについて検証していきたい。
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