転写制御における核内レセプターRORとGRとのクロストークおよびその生理学的意義

• Project/Area Number: 12028235
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Institution: University of Occupational and Environmental Health, Japan
• Principal Investigator: 松井 隆司 産業医科大学, 医学部, 助教授 (10140906)
• Project Period (FY): 2000
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2000)
• Budget Amount: ¥1,800,000 (Direct Cost: ¥1,800,000); Fiscal Year 2000: ¥1,800,000 (Direct Cost: ¥1,800,000)
• Keywords: 核内レセプター / RORa / GR / 転写制御 / クロストーク / コアプロモーター / メディエーター

Research Abstract

RORa依存的なPcp-2プロモーターやGR依存的なMMTVプロモーターの転写で観察されるこれら二つの核内レセプター間の負のクロストーク機構を解析した。その結果、RORaのC-末に存在する類似したアミノ酸配列が9回繰り返す領域が、また、GRの核移行シグナルを含むDNA結合ドメイン領域がそれぞれクロストークに必要であることが明らかになった。用いたプロモーターの解析やEMSA法によるDNA結合実験から、他の転写制御因子のクロストークへの関与の可能性、RORaとGRとの直接の相互作用によるクロストークの可能性が否定された。また、クロストークにGRのリガンドドメインが必要でないことから、SRC-1など既知のコアクチベーターでなく新規のメディエーターが関与している可能性が示唆された。一方、他の遺伝子の転写制御の解析から、ROREおよびGREがサポシン遺伝子(pSAP〉プロモーターに対して不活性であることを見い出したので、クロストークに与えるコアプロモーターの影響を調べた。その結果、RORE依存的なtkプロモーターの転写はGRにより抑制されず、またパリンドロームGRE依存的なtkプロモーターの転写もRORaにより抑制されないが、5つのhalf-siteから構成されるMMTVのGRE依存的な転写では抑制されることが明らかになった。RORaとGRとの間の負のクロストークはコアプロモーター特異的であり、またGREの型にも影響されることから、RORaあるいはGRと相互作用するメディエーターを含めた転写開始複合体内のタンパクがコアプロモーターにより異なり、この違いがそれぞれの核内レセプターによる転写活性化ばかりでなく、クロストークにも影響を及ぼしていると示唆された。今後、転写開始複合体内の因子も含めてこの負のクロストークに関与する因子を同定する計画である。