正常ヒト造血幹細胞の増殖・分化におけるMAPキナーゼとSTAT系の機能解析

Research Project

Project/Area Number	12036216
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
Allocation Type	Single-year Grants
Review Section	Biological Sciences
Research Institution	Osaka City University
Principal Investigator	北川誠一大阪市立大学, 医学部, 教授 (50133278)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	鈴木賢一大阪市立大学, 医学部, 助手 (20305618)
Project Period (FY)	2000
Project Status	Completed (Fiscal Year 2000)
Budget Amount *help	¥2,700,000 (Direct Cost: ¥2,700,000) Fiscal Year 2000: ¥2,700,000 (Direct Cost: ¥2,700,000)
Keywords	造血幹細胞 / CD34 / 好中球 / MAPキナーゼ / ERK / p38 / STAT / PI-3K
Research Abstract	MAPキナーゼ系とJAK-STAT系は造血細胞における主要な細胞内シグナル伝達系を構成している。我々は正常ヒト造血幹細胞(CD34陽性細胞)を用いて、特定のMAPキナーゼサブタイプ力スケードがサイトカイン特異的に活性化されることを明らかにした。すなわち、G-CSF、GM-CSF、SCF、TPO及びIL-3によりMEK-ERK系のみが特異的に活性化され、IL-1βによりMKK3/6-p38MAPキナーゼ系のみが活性化されること、また、TNFαによりMEK-ERK、MKK4-JNK及びMKK3/6-p38MAPキナーゼ系が活性化されることを明らかにした。一方、IL-6、IFNα及びIFNγはいずれのMAPキナーゼカスケードも活性化しなかった。これらの結果は、成熟好中球および細胞株を用いて得られた結果とは異なり、細胞分化に伴い活性化されるMAPキナーゼサブタイプカスケードが変化すること、並びに細胞株においては異常な刺激伝達系が発達していることを示している。さらに、CD34陽性細胞においては、STAT3α、STAT3β、STAT5a、STAT5b、STAT1αおよびSTAT1βのチロシンまたはセリン残基のリン酸化がサイト力イン特異的に生じることも明らかになった。例えば、SCFはHIX及びPI-3Kを介してSTAT3のセリン残基をリン酸化し、IL-6+soluble IL-6 receptorはH7-sensitive kinase及びPI-3Kを介してSTAT3のセリン残基をリン酸化し、同時にチロシン残基もリン酸化することが明らかになった。CD34陽性細胞の増殖・分化に対する様々なサイトカインの特異的な併用効果は、これらのシグナル伝達系のクロストークにより生じると考えられる。