| Project/Area Number |
12202051
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Review Section |
Biological Sciences
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| Research Institution | Okazaki National Research Institutes |
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Principal Investigator |
長谷部 光泰 岡崎国立共同研究機構, 基礎生物学研究所, 教授 (40237996)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
西山 智明 日本学術振興会, 特別研究員
藤田 知道 岡崎国立共同研究機構, 基礎生物学研究所, 助手 (50322631)
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| Project Period (FY) |
2000
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2000)
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| Keywords | ヒメツリガネゴケ / アクチベーション / 完全長ライブラリー / オーキシン / サイトカイニン |
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| Research Abstract |
本研究では、ヒメツリガネゴケをモデルとして、オーキシンとサイトカイニンの生合成、受容、情報伝達に関わる遺伝子を誘導cDNAアクチベーション法(全長cDNAを過剰発現プロモーターによって発現させ、変異体を得る方法)により網羅的に単離することを目的としている。
1.mRNAの5'末端に存在するキャップ構造を利用してヒメツリガネゴケ完全長cDNAライブラリーを作成した(理研篠崎研、林崎研との共同研究)。現在、オーキシン処理、サイトカイニン処理したヒメツリガネゴケ由来の完全長cDNAライブラリーを作成中である。
2.作成したヒメツリガネゴケ完全長cDNAライブラリーのうち、1000クローンの塩基配列を決定した結果、90%以上が、完全長cDNAであることがわかった。来年度末までに3万クローンの配列決定、カタログ化を行う予定である。
3.被子植物のオーキシン応答プロモーターであるDR5、GH3プロモーターにGFPをつないだコンストラクトを作成し、ヒメツリガネゴケのニュートラルサイトであるPpHB9サイトに導入した。その結果、GH3プロモーターがヒメツリガネゴケ内で局所的に発現していることがわかり、オーキシンの分布の指標として使える可能性があることがわかった。
4.2で塩基配列決定したクローンを、順次、オーキシン応答プロモーター::GFPを持つヒメツリガネゴケに導入し、過剰発現株の作成を開始した。来年度末までに7千変異体の単離をめざしている。
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