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GFP標識細胞を用いた放射線応答遺伝子の解析

Research Project

Project/Area Number 12217040
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)

Allocation TypeSingle-year Grants
Review Section Biological Sciences
Research InstitutionTokyo University of Pharmacy and Life Science

Principal Investigator

平野 和也  東京薬科大学, 薬学部, 講師 (80251221)

Project Period (FY) 2000
Project Status Completed (Fiscal Year 2000)
Budget Amount *help
¥5,900,000 (Direct Cost: ¥5,900,000)
Fiscal Year 2000: ¥5,900,000 (Direct Cost: ¥5,900,000)
KeywordsGFP / radiation / MUCl / tumor antigen
Research Abstract

in vivoでの腫瘍の放射線応答、照射効果の解析を行うため、GFP標識細胞を利用してin vivoでの照射後、少数のGFP標識細胞を回収し、c-myc,c-fos,p53,p21,MUCl等の放射線応答遺伝子の発現の変化を解析する系の開発をめざす。本年度は特定の細胞株HT-29を用いて、特定の放射線応答分子としてMUClに注目して解析を行った。まずHT-29/GFP細胞を樹立した。増殖速度、X線感受性等の各種性状解析を行い、親株と同様の性質であることを確認した後、ヌードマウスに移植し、in vivoでの腫瘍形成を行い、in vivoでX線照射した後にGFP標識細胞選択回収し、放射線応答分子MUClの発現を解析する系を確立することができた。またMUClのin vitroとin vivoでの応答パターンを比較することが可能となった。さらに他の細胞系、応答分子、測定系について解析をすすめる予定である。本年度は、特定の細胞株、特定の放射線応答分子についてではあるが、in vivoでX線照射した後にGFP標識細胞選択回収し、放射線応答分子の発現を解析する系を確立することができた。以上により、本研究においてMUClの発現に注目することとした。次年度以降は放射線照射後、より少数の細胞を迅速に、マウスから回収し、RT-PCR法による解析系を確立することをめざす。そして放射線応答に関写し、あるいは誘導されることが知られている蛋白(p53、p21、p41等)、増殖、転移に関与する分子(HGF、MUCl等)のmRNAの発現を調べ、in vitroとin vivoでの発現の異同を比較する。その結果、in vitroとin vivoで応答に違いのあった遺伝子については、さらにその原因を調べ、in vivoでの照射効果判定への応用の可能性を検討する。

Report

(1 results)
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  • Research Products

    (5 results)

All Other

All Publications (5 results)

  • [Publications] Y.Kang,K.Hirano,N.Suzuki et al.: "Increased expression after X-irradiation of MUCl in cultured human colon carcinoma HT-29 cells."Jpn.J.Cancer Res.. 91. 324-330 (2000)

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  • [Publications] A.Enomoto,N.Suzuki,K.Hirano et al.: "Involvement of SAPK/JNK pathway in X-ray-induced rapid cell death of human T-cell leukemia cell line MOLT-4."Cancer Letters. 155. 134-144 (2000)

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  • [Publications] M.Tomita,NSuzuki,Y.Matsumoto,K.Hirano et al.: "Sensitization by Wortmannin of Heat or Radiation Induced Cell Death in Cultured Chinese Hamster V79 cells."J.Radiat.Res.. 41(2). 93-102 (2000)

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  • [Publications] A.Morita,N.Suzuki,Y.Matsumoto,K.Hirano et al.: "p41 as a Possible Marker for Cell Death Is Generated by Caspase Cleavage of p42/SETb in Irradiated MOLT-4 Cells"Biochem.and Biophys.Res.Com.. 278(3). 627-632 (2000)

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  • [Publications] Y.Matsumoto,N.Suzuki,K.Hirono et al.: "Cleavage and phosphorylation of XRCC4 protein induced by X-irradiation."FEBS Lett.. 478(1-2). 67-71 (2000)

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Published: 2000-04-01   Modified: 2018-03-28  

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