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哺乳類GAL4/UASシステムの開発による時計遺伝子発振システムの解明

Research Project

Project/Area Number 12558092
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (B)

Allocation TypeSingle-year Grants
Section展開研究
Research Field Neuroscience in general
Research InstitutionKobe University

Principal Investigator

岡村 均  神戸大, 医学部, 教授 (60158813)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 山口 瞬  神戸大学, 医学部, 助手 (70304087)
Project Period (FY) 2000 – 2002
Project Status Completed (Fiscal Year 2001)
Budget Amount *help
¥10,300,000 (Direct Cost: ¥10,300,000)
Fiscal Year 2001: ¥2,600,000 (Direct Cost: ¥2,600,000)
Fiscal Year 2000: ¥7,700,000 (Direct Cost: ¥7,700,000)
KeywordsGAL4-UAS / mPer1プロモーター / 時計遺伝子 / トランスジェニックマウス
Research Abstract

この実験は、ショウジョウバエの遺伝子導入に良く用いられているyeastのGAL4-UASシステムを哺乳類で確立し、時計遺伝子・時計関連遺伝子と想定される遺伝子を自在にサーカディアンセンターである視交叉上核に発現させ得る系を確立する事を目的としている。これにより、ある特定の遺伝子を視交叉上核に過剰発現させる事ができ、行動リズムをモニターする事により、この遺伝子のサーカディアンシステムに及ぼす影響が測定できる。今年度、mPer1プロモーターにUAS及びGAL4をつないだDNAをもつトランスジェニックマウスの作成し、UASに対象とする遺伝子のcDNAをつないだDNAをもつトランスジェニックマウスをも作成した。遺伝子の導入は、熊本大学動物資源開発研究センターにおいて、マウス受精卵にDNAをマイクロインジェクションすることにより行ない、現在マウスができて尾部より抽出したゲノムDNAを、サザンハイブリダイゼーション法で遺伝子導入を確定した。得られたトランスジェニックマウスは、wild typeのマウスと掛け合わせ、数を増やしている最中である。mPer1プロモーターにUAS及びGAL4をつないだトランスジェニックマウスの系統については、GAL4遺伝子のコード領域をプローブとして、視交叉上核において適切な発現パターンを示すトランスジェニックマウスを以後の実験に使用する。対象とする系統については、時計遺伝子mPer1,mPer2,mPer3を作成した。

Report

(1 results)
  • 2000 Annual Research Report
  • Research Products

    (7 results)

All Other

All Publications (7 results)

  • [Publications] Yagita K. et al.: "Dimerization and nuclear entry of mPER proteins in mammalian cells"Genes & Development. 14巻. 1353-1363 (2000)

    • Related Report
      2000 Annual Research Report
  • [Publications] Yamaguchi S. et al.: "Role of DBP in the circadian oscillatory mechanism"Molucular and Cellular Biology. 20巻. 4773-4781 (2000)

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      2000 Annual Research Report
  • [Publications] Yagita K. et al.: "Forskolin induces circadian gene expression of rPer1, rPer2 and dbp in mammalian rat-1 fibroblasts"FEBS Letter. 465巻. 79-82 (2000)

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      2000 Annual Research Report
  • [Publications] Yan L. et al.: "Distribution and circadian expression of dbp in SCN and extra-SCN areas in the mouse brain."Journal of Neuroscience Research. 59巻. 291-295 (2000)

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      2000 Annual Research Report
  • [Publications] Moriya T. et al.: "N-methyl-D-aspartate receptor subtype 2C is not involved in circadian oscillation or photice entrainment of the biological clock in mice."Journal of Neuroscience Research. 61巻. 663-673 (2000)

    • Related Report
      2000 Annual Research Report
  • [Publications] Yamaguchi S. et al.: "The 5' upstream region of mPer1 gene contains two promoters and is responsible for circadian oscillation."Current Biology. 10巻. 873-876 (2000)

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      2000 Annual Research Report
  • [Publications] Horikawa K. et al.: "Non-photic entrainment by 5-HT1A/7 receptor agonists accompanying with reduction of Per1 and Per2 expression."Journal of Neuroscience. 20巻. 5867-5973 (2000)

    • Related Report
      2000 Annual Research Report

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Published: 2000-04-01   Modified: 2016-04-21  

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