| Budget Amount *help |
¥3,300,000 (Direct Cost: ¥3,300,000)
Fiscal Year 2002: ¥500,000 (Direct Cost: ¥500,000)
Fiscal Year 2001: ¥500,000 (Direct Cost: ¥500,000)
Fiscal Year 2000: ¥2,300,000 (Direct Cost: ¥2,300,000)
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| Research Abstract |
昨年度までに,ラットミルク中に,並びに乳腺組織ホモジネート中に抗NGF抗体と免疫学的に反応する分子量65kDaと26kDaの免疫反応物質が存在する事を確認した.また,授乳期乳腺において,分泌顆粒を放出している乳腺上皮細胞上部(内腔側)に抗NGF抗体と免疫学的に反応する物質が存在している事も明らかにした.更に,乳腺におけるNGF受容体(低親和性NGF-R^<p75>)が乳腺上皮基底層に局在している事を認めた.
本年度は,ラット乳腺組織における高親和性NGF受容体(Trk)の局在を抗Trk-pan抗体(Trk A, Trk B, Trk Cのすべてを認識する)を用いて免疫組織化学的に検討した.その結果,抗Trk-pan抗体との免疫学的反応物質が,微弱ながらも乳腺上皮細胞層のbaso-lateral junctionで認められた.これらのことから,ラット乳腺上皮細胞はNGF様物質を産生・分泌し,乳汁を介して新生児の生育に対する何らかの作用(例えば栄養源,免疫賦活作用など)に関わっている可能性が示唆された.更に,乳腺におけるNGF受容体(低親和性NGF-R^<p75>と高親和性NGF受容体Trk)が乳腺上皮基底層や乳腺上皮細胞層のbaso-lateral junctionで認められた事などを考え合わせると,NGFは乳腺組織自身に対しても,autorine機構やparacrine機構を介してその形態や機能にも深く関わっている可能性が考えられる.
一方,ラット乳腺におけるNGF, NGF-R^<p75>,Trkの発現をより明確にするために,RT-PCR解析実験に着手した.ラット乳腺のtotal RNAサンプルの調製の後,Oligo(dT)プライミングによりcDNAを合成した.そして,NGF用,NGF-R^<p75>用,Trk A用のそれぞれの合成オリゴプライマーセット(各20 nt)の調製を終え,現在,解析を進めている.
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