ヒトアルドース還元酵素発現マウスを用いた糖尿病性自律神経障害の発症機構の解明
| Project/Area Number |
12770629
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Field |
Metabolomics
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| Research Institution | Hirosaki University |
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Principal Investigator |
山岸 晋一朗 弘前大学, 医学部, 助手 (80301026)
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| Project Period (FY) |
2000 – 2001
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2001)
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| Budget Amount *help |
¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
Fiscal Year 2001: ¥500,000 (Direct Cost: ¥500,000)
Fiscal Year 2000: ¥1,500,000 (Direct Cost: ¥1,500,000)
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| Keywords | ポリオール代謝 / トランスジェニックマウス / 腹腔神経節 / PKC活性 / Na^+ / K^+ ATPase活性 / 形態計測 / アルドース還元酵素 / 神経節 / K^+ATPase活性 |
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| Research Abstract |
糖尿病性神経障害の発症におけるポリオール代謝の役割を解明するため、ヒトアルドース還元酵素(hAR)発現トランスジェニックマウス(Tg)を高血糖状態にし、Tgに生じた神経障害について解析した。対照にはhAR陰性マウス(LM)を用い、糖尿病群の半数にはAR阻害剤の投与を行った。経時的に血糖、体重、痛覚閾値、運動神経伝導速度(MNCV)の測定を行い、病期12週目で末梢神経、腹腔神経節を摘出した。腹腔神経節はグルタール固定エポン包埋標本を作製し、トルイジンブルー染色標本にて神経節細胞の形態計測を行った。凍結末梢神経標本を用いて、Na^+/K^+ ATPase活性、Protein kinase C(PKC)活性を測定した。その結果、痛覚閾値は、5週では正常群に比し、糖尿病Tg群で低下したが、9週以後は有意に延長した。MNCVは、糖尿病Tg群で、正常群、糖尿病LM群に比し有意に延長した。神経節の形態計測では、細胞横断面積が、糖尿病LM群で11%、糖尿病Tg群で28%、有意に低下した。膜分画のPKC活性は、正常群に比し、糖尿病LM群で13%、糖尿病Tg群で28%低下した。Na+/K+ ATPase活性は、正常群に比し、糖尿病LM群で46%、糖尿病Tg群で62%低下した。これらの変化をAR阻害剤は、糖尿病Tg群、糖尿病LM群共、有意に改善した。神経節の免疫染色では、高血糖、ポリオール代謝亢進と共に、PKCαの細胞質から膜への移動障害が認められた。以上、糖尿病Tgの神経では、主としてPKCα分画の変化に起因する有意なPKC活性低下、Na^+/K^+ ATPase活性低下が生じ、形態学的にも、自律神経節でヒト糖尿病と同様の細胞萎縮が生じることを示した。このことから、ポリオール代謝の亢進は、神経障害発症に重要な役割を果たしており、自律神経障害にも関与していると考えられた。
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Report
(2 results)
Research Products
(2 results)
