知覚神経による骨代謝調節に関する研究

• Project/Area Number: 12770795
• Research Category: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Orthopaedic surgery
• Research Institution: Osaka City University
• Principal Investigator: 乾 健太郎 大阪市立大学, 大学院・医学研究科, 助手 (00291592)
• Project Period (FY): 2000 – 2001
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2001)
• Budget Amount: ¥1,800,000 (Direct Cost: ¥1,800,000); Fiscal Year 2001: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000); Fiscal Year 2000: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
• Keywords: 骨代謝 / 神経ペプチド / 軟骨細胞 / 破骨細胞 / 知覚神経 / 骨芽細胞

Research Abstract

前年度に引き続き、神経ペプチドとしてcalcitonin gene-related peptide(CGRP)を用いて、知覚神経系の骨代謝への関与を検索した。
前年度は主に骨形成細胞培養系にCGRPを様々な条件下で添加しその反応を検討したが、CGRPはウサギ肋軟骨成長軟骨細胞と骨髄由来骨芽細胞用細胞に対しては強い活性を示さなかった。これはCGRPの細胞膜受容体はcalcitoninと共有することから、その骨代謝への作用は主に破骨細胞を介して発揮することが容易に想像される。そこで、今年度は、マウス頭蓋冠由来骨芽細胞とウサギ骨髄細胞との共培養系を用いて、CGRPによる破骨細胞への影響を中心に検討した。
方法は、共培養系を用いてCGRP添加による破骨細胞への影響を、破骨細胞形成数を指標に行った。共培養系は昭和大学歯学部で確立した方法を用いるため、現地に赴いて方法論を踏襲した。共培養翌日から、TNF-α存在・非存在下各々の条件下でCGRPを添加し、CGRPの破骨細胞形成能に対する影響を見たものの、全ての条件下においてpositive dataが得られなかった。これは、実験系自体の問題が大きく影響しているためと考えられたため、ウシ胎児血清のLot、細胞密度、等の培養条件を変えて行うも、破骨細胞自体の形成が実験を重ねるごとに悪くなり、課題研究期間中には示唆に富むデータが得られなかった。今後も培養条件を変えて研究を続ける予定である。