糖尿病ラット脈絡膜における一酸化窒素合成酵素の生化学的解析

• Project/Area Number: 12771015
• Research Category: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Ophthalmology
• Research Institution: Kanazawa University
• Principal Investigator: 桜井 真由美 金沢大学, 医学系研究科, 助手 (50303269)
• Project Period (FY): 2000 – 2001
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2001)
• Budget Amount: ¥1,700,000 (Direct Cost: ¥1,700,000); Fiscal Year 2001: ¥600,000 (Direct Cost: ¥600,000); Fiscal Year 2000: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000)
• Keywords: 糖尿病 / 脈絡膜 / 一酸化窒素合成酵素

Research Abstract

高血糖と脈絡膜NOSの関係を検討するため、Brown-Norwayラットにストレプトゾトシン(STZ)を腹腔内注射し、高血糖を確認後、経時的に脈絡膜NOS活性を測定したところ、STZ注射2週後では活性に変化はみられなかったが、6週後、13週後では、糖尿病ラットにおいて活性の低下がみられた。イムノブロットの結果、6週、13週では糖尿病ラットにおいてnNOSタンパク量が低下していた。また、STZ注射2週後より、4週間インシュリンを皮下投与し、血糖を正常化させると、脈絡膜NOS活性は正常化する傾向がみられ、可溶画分のnNOSタンパク量の回復がみられた。別の高血糖モデルである自然発症糖尿病ラット(Otsuka Long-Evans Tokushima Fatty, OLETFラット)の脈絡膜NOS活性を生後約60週で測定すると、同週齢の対照ラット(Long-Evans Tokushima Otsuka, LETOラット)に比較して低下していた。以上より、高血糖の持続と脈絡膜NOS活性の低下の関連性が示唆された。
糖尿病脈絡膜における組織学的な変化を観察するために、STZ注射6週後のWistarラットを潅流固定後、脈絡膜一色素上皮を分離し、nNOSの局在を反映するとされるNADPHジアホラーゼ染色を行った。対照ラットと比較して、組織学的に顕著な変化はみられなかった。